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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪

英文名称:Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Green Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
产品参数
Ex (nm)498Em (nm)517
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关事件的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学过程。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Green过氧化物传感器来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 绿色过氧化物传感器具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488nm 滤波片
Em: 530/30nm 滤波片
推荐通道: FITC通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.使用OxiVision Green过氧化物染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用流式细胞仪FITC通道监测荧光强度(Ex / Em = 490/530 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 绿色过氧化物传感器原液:
将100μLDMSO(组分B)加入到OxiVision 绿色过氧化物(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:1μL重组的OxiVision 绿色过氧化物储备溶液适用于0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

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样品分析

1.使用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备溶液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞30分钟,避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后,将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用测试化合物在37℃处理细胞一段所需的时间。取出处理溶液,然后用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备液在全培养基或37°C所需的缓冲液中染色细胞一段所需的时间。

4.使用流式细胞仪监测FITC通道(Ex / Em = 490 / 530nm)的荧光强度。

 

参考文献

Role of Polydopamine’s Redox-Activity on its Pro-oxidant, Radical-Scavenging, and Antimicrobial Activities
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Haoqi Tan, Jialin Song, Miao Lei, Eunkyoung Kim, Gregory F Payne, Changsheng Liu
Journal: Acta Biomaterialia (2019)

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55--63

 

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