Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测
| Ex (nm) | 613 | Em (nm) | 631 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位（MMP）的消失来检测细胞凋亡。 MMP的凋亡与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合，导致细胞色素C释放到细胞质中，进而触发了细胞凋亡级联反应中的其他下游事件。我们的Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒可通过优化的测定方法提供所有基本成分。荧光测定法使用我们专有的阳离子MitoTell Red检测MMP消失的细胞凋亡。在正常细胞中，当MitoTell Red堆积在线粒体中时，红色荧光强度会增加。但是，在凋亡细胞中，MMP凋亡后，MitoTell Red的荧光强度降低。 MitoTell Red染色的细胞可以通过荧光显微镜Cy5通道或荧光酶标仪读取。该试剂盒经过优化，可通过荧光酶标仪读取凋亡和抑制剂。而且该测定可以以方便的96孔和384孔荧光酶标仪进行检测，而无需清洗步骤。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。
荧光酶标仪 |
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| Ex: | 610 nm |
| Em： | 650 nm |
| Cutoff： | 630 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式： | 底读模式 |
样品实验方案
简要概述
- 准备细胞
- 添加测试化合物
- 添加MitoTell Red工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
- 将板在5％CO2、37°C的培养箱中孵育30分钟
- 添加测定缓冲液B（50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板）
- 在Ex / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm）或使用Cy5滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加（底部读取模式）
溶液配制
将50 µL的200X MitoTell Red（组分A）添加到10 mL的测定缓冲液A（组分B）中，并充分混合以制成MitoTell Red工作溶液，避光。
实验步骤
1.用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。注意：我们用20 µM CCCP处理HeLa细胞15分钟，以改变线粒体膜电位。CCCP或FCCP可以与MitoTell Red同时添加。为了获得结果，可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。
2.将100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoTell Red工作溶液加入细胞板。
3.在避光的条件下，将板在37ºC下孵育15-30分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
4.将50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的测定缓冲液B（组分C）添加到细胞板中。注意：加载后请勿洗涤细胞。对于非贴壁细胞，建议在加入测定缓冲液B（组分C）后，以800 rpm离心细胞板2分钟，然后制动。
5.加入测定缓冲液B（组分C）后10到30分钟，用荧光酶标仪（Ext / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm））检测荧光强度，或在荧光下用带Cy5滤镜的显微镜观察荧光信号。
参考文献
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