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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 橙色荧光

英文名称:Cell Navigator® F-Actin Labeling Kit *Orange Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)541Em (nm)557
分子量-溶剂-
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体和细胞核等。活细胞区的选择性标记提供了一种研究空间细胞事件的有效方法。

该特定试剂盒用于标记橙色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用橙色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。橙色荧光鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 550 / 575nm。 缀合物对荧光成像也具有良好的光稳定性。 它是一种高亲和力探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest 研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品分析 

概述

准备样品(微孔板孔)从板上取下液体

加入100μL/孔的iFluor 546-鬼笔环肽溶液

在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞

使用TRITC通道在显微镜下观察样品(Ex / Em = 550/575 nm)

注意:打开前将所有组件加热至室温

 

操作步骤

1.准备1X iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 546-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注意1:未使用的1X iFluor 546-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃,避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后使用TRITC通道进行板密封和成像。

 

        图1.用甲醛固定并用Cell Navigator F-肌动蛋白标记试剂盒染色的CPA细胞的图像*在Costar黑色96孔板中的橙色荧光* A:用1X iFluor 546-鬼笔环肽标记细胞仅30分钟。 B:用鬼笔环肽处理细胞10分钟,然后用1X iFluor 546-鬼笔环肽染色30分钟。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

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Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508--34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842--32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
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Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
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The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
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Distinct mechanical behavior of HEK293 cells in adherent and suspended states
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Jun Miyake
Journal: PeerJ (2015): e1131

The preparation and characterization of polycaprolactone/graphene oxide biocomposite nanofiber scaffolds and their application for directing cell behaviors
Authors: Juqing Song, Huichang Gao, Guanglin Zhu, Xiaodong Cao, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Carbon (2015): 1039--1050

Actin-based biomechanical features of suspended normal and cancer cells
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Yuji Shimizu, Shunsuke Yuba, Jun Miyake
Journal: Journal of bioscience and bioengineering (2013): 380--385