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Cell Navigator 荧光法脂滴检测分析试剂盒 *绿色荧光*

英文名称:Cell Navigator® Fluorimetric Lipid Droplet Assay Kit *Green Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)504Em (nm)510
分子量-溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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产品优势

低背景干扰:对脂滴具有高特异性,背景噪声极低

应用广泛:兼容荧光显微镜、流式细胞术及荧光酶标检测

 

适用范围

用于检测细胞内脂滴

 

产品介绍

脂滴(亦称脂质体、油体或脂肪小体)是富含脂质的细胞器,负责调控中性脂质的储存与水解。它们同时作为多种重要生物过程的脂质来源储备库,例如为能量代谢及膜形成与维持提供脂肪酸和细胞胆固醇。细胞质脂滴的异常积聚与多种病理状态相关,可作为代谢缺陷或疾病发生的指示标志。

AAT Bioquest公司的Cell Navigator®荧光法脂滴检测试剂盒提供了一种可定量测量脂滴积聚的简易方法。该试剂盒采用Nile Green™作为亲脂性染料,其在脂质富集环境中会发出强烈荧光,而在水性介质中荧光极弱。Nile Green™是用于荧光显微镜、流式细胞术或荧光酶标仪检测细胞内脂滴的优异活细胞染色剂。与具有宽范围荧光光谱的尼罗红不同,Nile Green™仅标记出绿色荧光的细胞内脂滴,可与其他荧光染料配合实现多色标记。使用FITC滤光片组即可观测其绿色荧光信号。

 

适用仪器


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 

荧光酶标仪

 
Ex: 485 nm
Em: 520 nm
Cutoff: 510 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

样品实验方案

简要概述

用测试化合物准备细胞

添加Nile Green 工作溶液

在室温或37°C下孵育10至30分钟

读取荧光强度

 

溶液配制

工作溶液配制

通过将5 µL 200X Nile Green (组分A)稀释到1 mL染色缓冲液(组分B)中来制备Nile Green 工作溶液。

注意:50 µL的Nile Green (组分A)足以容纳一个96孔板。 避光。 Nile Green 的浓度取决于具体应用。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

对于贴壁细胞

1.在96孔黑色壁/透明底板(100 µL /孔/ 96孔)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上生长细胞。

2.轻轻吸出培养基,并加入等体积(例如100 µL /孔/ 96孔板)的Nile Green 染色溶液。

3.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育10-30分钟。

4.去掉Nile Green 工作溶液(可选)。

5.用酶标仪读取485/520 nm处的荧光,或使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。
 
对于悬浮细胞:

1.将细胞以1000 rpm的速度离心5分钟,以得到每管1-5×105个细胞。

2.在500 µL Nile Green 工作溶液中重悬细胞。

3.在避光条件下,于室温或37°C孵育10至30分钟。

4.离心除去Nile Green 工作溶液,然后将细胞重悬于500 µL预热的培养基或您选择的缓冲液中,以使每管1-5×105个细胞(可选)。