Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒*蓝色荧光*
Ex (nm) | 344 | Em (nm) | 457 |
分子量 | N/A | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.特异性标记内质网,性能优于DiOC₆(3)等传统内质网染料
2.固定细胞后ER染色保持良好
3.可直接兼容标准DAPI滤光片系统,无需特殊配置
适用范围
主要用于标记活细胞
产品介绍
内质网(Endoplasmic Reticulum,ER)是真核细胞中一种由扁平膜囊或管状结构(称为潴泡)相互连接构成的细胞器网络,其膜结构与核膜外层相延续。该结构普遍存在于大多数真核细胞中,但在红细胞和精子细胞中缺失。
Cell Navigator®活细胞内质网染色试剂盒采用ER Tracer™ Blue作为内质网标记物。该染色剂是一种具有细胞膜渗透性的荧光染料,对内质网表现出高度选择性。其分子结构由蓝色荧光染料与内质网特异性结合基团组成,可在多数细胞类型中精准标记内质网(注:某些特殊细胞类型可能存在选择性偏差)。
ER Tracer™ Blue的光谱特性与DAPI相似,因此可直接兼容DAPI滤光片。该产品可作为ThermoFisher公司ER Tracker™(注册商标)的有效替代方案
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | DAPI 滤波片组 |
Em: | DAPI 滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样本分析方案
操作流程摘要
1.使用生长培养基制备细胞样本
2.将细胞与ER Tracer™ Blue工作液于37°C孵育15-30分钟
3.使用荧光显微镜观察(DAPI滤光片组)
细胞样本制备
有关细胞样本制备的具体操作指南,请访问:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
储备液配制
除非另有说明,所有未使用的储备液均应分装为单次使用量,配制后保存于-20°C,避免反复冻融
ER Tracer™ Blue储备液(500X)
向ER Tracer™ Blue(组分A)瓶中加入20 µL DMSO(组分C),充分混匀,配制成500X ER Tracer™ Blue储备液。
工作液配制
ER Tracer™ Blue工作液
取2 µL 500X ER Tracer™ Blue储备液加入1mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,混匀后即为工作液。
注:配好的ER Tracer™ Blue工作液在室温避光条件下至少可稳定保存2小时
操作步骤
1.按实验需求进行细胞铺板和处理
吸弃细胞培养液(可选步骤:使用自选缓冲液洗涤细胞两次)
2.向细胞板中加入ER Tracer™ Blue工作液(96孔板:每孔100 µL;384孔板:每孔50 µL),37°C避光孵育细胞与工作液15-30分钟
注意1.探针最佳浓度需根据具体应用优化,工作液浓度过高可能导致细胞毒性
2.染色条件可根据细胞类型及探针渗透性进行调整
3.移除各孔中的ER Tracer™ Blue工作液,使用生理相关缓冲液洗涤细胞三次
4.使用4%甲醛固定细胞5-10分钟,用生理相关缓冲液洗涤细胞三次
5. 使用配备DAPI滤光片组的荧光显微镜观察细胞荧光信号
试剂应用文献
Sustainable Functional Nanomaterials Based on Self-Aggregation: A Radically New Approach to Active Cell Transport and Nanoencapsulation
Authors: Hernando-Mu{\~n}oz, Carla and Revilla-Cuesta, Andrea and Abajo-Cuadrado, Irene and Andreini, Camilla and Torroba, Tom{\'a}s and Busto, Natalia and Fern{\'a}ndez, Dar{\'\i}o and Perdomo, Germ{\'a}n and Acosta, Gerardo A and Royo, Miriam and others,
Journal: (2024)