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Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

英文名称:Cell Navigator® Live Cell RNA Imaging Kit *Green Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)509Em (nm)527
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,对活细胞中的RNA分子进行检测和成像对于多种分子生物学程序重要,包括物理运输,遗传信息解释,基因表达调控和某些重要的生物催化作用。 在活细胞中染色RNA的主要挑战是DNA造成的干扰。 为了解决该困难,开发了新型绿色荧光染料作为RNA选择性探针。 AAT Bioquest的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒包括StrandBrite RNA Green,因为它能特异性结合细胞中的RNA。 与用于体内RNA染色的商用SYTO®RNA Select染料相比,StrandBrite RNA Green显示出更亮的信号和对RNA的更好的选择性。 此外,该试剂盒可对活细胞和固定细胞中的RNA进行染色。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 490 nm
Em: 520 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: FITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.添加StrandBrite RNA Green工作溶液
3.孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 490/520 nm(FITC滤光片组)的荧光显微镜下分析细胞

 

样品示例及操作

1.根据特定的诱导方案将细胞培养至适合成像的密度(约1-2×104个细胞/孔/ 96孔板)。

2.对于活细胞:将室温下用培养基或活细胞染色缓冲液(组分B)中稀释400倍的StrandBrite RNA Green(组分A)孵育细胞30-60分钟(100 µL /孔)。注意:25 µL StrandBrite RNA Green(组分A)足以容纳一个96孔板。避光并避免重复的冻融循环。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。有关详细信息,请参见图1。

3.对于固定细胞:在室温下用纯甲醇固定细胞1分钟,然后用PBS洗涤。将细胞浸入1%Triton-100中2分钟,然后用PBS洗涤两次。在室温下,用PBS中1X浓度的StrandBrite RNA Green(组分A)孵育细胞15-30分钟。注意:建议增加标记浓度或孵育时间,以使染料在细胞未充分染色的情况下积累。有关详细信息,请参见图1。

4.(可选)用PBS洗涤细胞1-2次,然后向每个孔中加入100 µL PBS。

5.使用荧光显微镜在Ex / Em = 490/520 nm(FITC通道)上监控荧光强度。
 

图1. HeLa细胞中RNA染色的荧光图像。 (A)使用Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒(绿色,目录号22630)对活细胞染色,并用Hoechst 33342(蓝色,目录号17530)复染。 (B)使用相同试剂盒将固定在甲醇中的细胞染色。 (C)染色后,将固定的HeLa细胞与0.5 mg / mL RNase在37ºC下孵育1小时。 RNase消化测试的图像表明StrandBrite RNA Green具有很高的选择性。 使用带有FITC滤光片的荧光显微镜测量绿色荧光信号。

 
 
 
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