Cell Navigator NBD神经酰胺高尔基体染色试剂盒 绿色荧光

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产品优势  

1.特异性强：靶向标记高尔基体

2.兼容性好：适用于活细胞和固定细胞

3.成像清晰：低背景高信噪比

 

适用范围

可选择性标记活细胞或醛固定细胞中的高尔基体

 

产品介绍

高尔基体是真核细胞胞质内由囊泡和折叠膜组成的复杂结构，参与分泌和胞内运输过程。其主要功能包括修饰内质网合成的蛋白质和脂质，为这些分子向胞外分泌做准备，同时在细胞内脂质运输和溶酶体形成中发挥关键作用。

Cell Navigator® NBD Ceramide高尔基体染色试剂盒提供了一种简便快速的方法，可选择性标记活细胞或醛固定细胞中的高尔基体。其原理是通过C6-NBD-神经酰胺与牛血清白蛋白形成的复合物（C6-NBD-Ceramide-BSA）被细胞摄取后，在细胞内代谢生成荧光产物从而特异性标记高尔基体。该试剂盒提供优化的检测方案，适用于通过荧光显微镜观察高尔基体形态学研究。

 

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荧光显微镜
Ex:	488滤波片组
Em：	525 滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板
滤波片组:	FITC滤波片组

样品分析方案

概述

按实验需求处理细胞样本

加入C6 NBD Ceramide工作液，室温或37℃孵育15~30分钟

更换染色缓冲液，室温或37°C孵育15~30分钟

使用 FITC 滤光片组在显微镜下观察

可选：用 4% 甲醛固定细胞

重要提示：实验前请将所有试剂组分室温解冻后使用

 

细胞样本制备指南

有关细胞样本制备的详细操作规范，请访问：

https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

 

储备液配制

所有未使用的储备液（除特殊说明外）均应分装为单次使用量，配制后保存于-20°C，并避免反复冻融。

C6 NBD神经酰胺储备液（100X）：

取C6 NBD神经酰胺（组分A）冻干粉加入100 µL DMSO（组分C）充分混匀

注意：未使用的C6 NBD神经酰胺储备液需分装后-20°C保存，避免反复冻融。

 

工作溶液配制

C6 NBD神经酰胺工作液

取10 µL NBD神经酰胺储备液（100X）加入990 µL染色缓冲液（组分B）充分混匀即得工作液

可选核染方案：在1 mL NBD神经酰胺工作液中加入10 µL Hoechst 33342（组分D），使用荧光显微镜DAPI滤光片组可同步观察细胞核染色。

 

样品实验方案

1.按实验需求铺板并处理细胞

2.将等体积C6 NBD神经酰胺工作液直接加入细胞培养基（示例：96孔板每孔100µL培养基对应加入100µL工作液）

3.室温或37℃孵育15-30分钟

4.吸弃工作液，更换为染色缓冲液（组分B，100µL/孔）

5.相同温度条件下（室温或37℃）继续孵育10-15分钟

6.使用荧光显微镜FITC滤光片组观察

 

可选：

吸弃步骤4染色缓冲液，96孔板添加100ul/孔，加入4%甲醛固定液（未提供，100µL/孔）

注意：悬浮细胞：请按实验需求加入适量4%甲醛固定液（推荐浓度为2×10⁶细胞/mL）

室温固定20-30分钟后吸弃，PBS洗涤2-3次，重新加入染色缓冲液100µL/孔（组分B）

本试剂盒同样适用于醛固定细胞样本，固定后请直接从上述步骤2开始执行染色流程。