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活细胞荧光示踪探针CFSE CAS 150347-59-4

英文名称:CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester] *CAS 150347-59-4*
产品参数
Ex (nm)498Em (nm)517
分子量557.46溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品货期

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适用范围

用于活细胞示踪

 

产品介绍

CFSE(羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯)是一种细胞膜渗透性绿色荧光示踪剂,适用于流式细胞术平台的多代次细胞增殖检测,其激发峰和发射峰分别为498 nm和517 nm。

CFSE是一种非荧光染料,可用于追踪多代细胞增殖过程。该染料具有细胞膜渗透性,能自由穿过活细胞膜。进入细胞后,分子中的乙酰基团被细胞内非特异性酯酶水解,形成荧光产物并蓄积在细胞内。由于失活细胞缺乏酯酶活性且细胞膜通透性改变,无法保留染料,因而不会产生荧光。活化后的CFSE染料能与细胞表面及胞内蛋白质(如赖氨酸侧链)的游离伯胺基团形成共价结合,这种特性使其可用于特定细胞在多代分裂过程中的追踪、计数和鉴定。

CFSE(荧光素衍生物,CFDA-SE)的激发光谱峰值位于498 nm,发射光谱峰值位于517 nm。该染料可被488 nm氩离子激光有效激发,使用流式细胞仪时可通过FL1通道或FITC滤光片组检测其荧光信号。

实验方案

样品方案分析

概述

用测试化合物制备细胞

添加0.5到5μMCFSE配制工作溶液

在室温或37℃下将染料与细胞一起孵育10到30分钟

去除染料工作溶液

使用Ex / Em = 490/520 nm(FL1通道)的流式细胞仪进行分析

注意:以下是我们推荐的活细胞方案。 它仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

操作步骤

1.准备10 mM DMSO储备溶液

      产品#22022:将5.6mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液(1mg / ml相当于1.8mM);

       产品#22028,向每个小瓶中加入90μLDMSO以制备10mM储备溶液。

注意:请及时使用储备液并且将剩余的溶液等分储存,并在<-20℃避光冷冻。避免反复冻融

 

2.准备CFSE工作溶液

使用之前,用Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或其他缓冲液(pH7)稀释步骤1中的DMSO储备液(20,000至2,000次),准备CFSE工作溶液(0.5至5μM)并离心。

 

3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞:

3.1用测试化合物细胞培养一段时间。

3.2离心细胞,每管取1-5×105个细胞。

3.3在500μL染料工作溶液中重悬细胞(来自步骤2)。

3.4在室温或37°C下用染料溶液孵育细胞10到30分钟,避光。

3.5从细胞中取出染料工作溶液,用HHBS或其他缓冲液清洗细胞。将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中,得到每管1-5×105个细胞。

3.6用流式细胞仪(FL1通道)或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。

 

试剂应用文献

Microalgal cell division tracking using CFSE
Authors: Pozzobon, Victor and Lagirarde, Jules and Arnoudts, Clarisse and Levasseur, Wendie
Journal: Algal Research (2024): 103501
 
Hypoxia-activated ADCC-enhanced humanized anti-CD147 antibody for liver cancer imaging and targeted therapy with improved selectivity
Authors: Qi, Fang-Zheng and Su, Hui-Shan and Wang, Bo and Qian, Luo-Meng and Wang, Yang and Wang, Chen-Hui and Hou, Ya-Xin and Chen, Ping and Zhang, Qing and Li, Dong-Mei and others,
Journal: MedComm (2024)
 
Restoration of miR-299-3p promotes macrophage phagocytosis and suppresses malignant phenotypes in breast cancer carcinogenesis via dual-targeting CD47 and ABCE1
Authors: Tong, Shoufang and Zhu, Yingli and Leng, Yeqing and Wu, Yunling and Xiao, Xingxing and Zhao, Wenfeng and Tan, Shuhua
Journal: International Immunopharmacology (2024): 111708