活细胞染色 CytoTell 绿色

货号22240存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格500 Tests价格1236
Ex (nm)492Em (nm)514
分子量~500溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

活细胞染色 CytoTell 绿色是美国AAT Bioquest生产的活细胞染色探针,流式细胞术结合荧光染色是分析异质细胞群体的有力工具。在所有现有的荧光染料中,CFSE是广泛用于活细胞分析的优选细胞增殖指示剂。然而,与使用CFSE监测细胞增殖相关的几个严重问题。 1),CFSE对细胞有很强的毒性。 CFSE与所有氨基无差别地反应,因此改变了许多关键的细胞内蛋白质功能(例如细胞膜GPCR); 2),CFSE反应慢,不方便使用。第二代细胞的CFSE荧光强度比第一代减少10倍以上。你将不得不等待另一代人开始细胞增殖分析。 3),由于CFSE与培养基成分发生反应,您必须使用流式细胞仪去除细胞分析培养基。 CytoTell Green已开发用于消除这些CFSE限制。根据我们客户对CytoTell Green的反馈,CytoTell UltraGreen是我们最新的改进。它有明显的优势。 1),CytoTell UltraGreen很好地保留在细胞中; 2),CytoTell UltraGreen的反应速度更快,使用起来比CFSE更方便。第一代和第二代之间的荧光强度差距显着减小。随着细胞分裂,CytoTell UltraGreen在子细胞之间平均分布,可以测量为染料荧光强度的连续减半; 3), CytoTell UltraGreen比CFSE更敏感。最多可以显现9代; 4), CytoTell UltraGreen比CFSE更稳定。 CytoTell UltraGreen原液可以在室温下储存几天。 CytoTell UltraGreen也可以用于标记细胞的长期追踪。使用双参数图进行分析可以为每一代提供更好的分辨率,特别是在未分裂的细胞和第一代细胞之间。使用标准的含甲醛固定剂和基于皂苷的透化缓冲液,用CytoTell UltraGreen标记的细胞可以被固定和透化以用于细胞内靶标的分析。 CytoTell UltraGreen具有519 nm的峰值激发,并且可以被蓝色(488 nm)激光线激发,从而与FITC滤光片组兼容。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的活细胞染色 CytoTell 绿色。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
推荐孔板: FITC通道


产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物准备细胞

2.加入1X染料工作液

3.在室温或37 o C 下将染料与细胞一起孵育10至30分钟

4.去除染料工作液

5.使用流式细胞仪和适当的过滤器进行分析

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。

CytoTell 染料储备液(500X):
将500 µL DMSO加入到染料粉瓶中,通过涡旋使其充分混合,得到储备液(500X)。注意:储备溶液应及时使用;应将所有剩余的溶液等分并在<-20 o C下冷冻。避免重复冻融循环,并避光。

 

2.工作溶液配制

CytoTell 染料工作溶液(1X):
在Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的pH 7缓冲液中以1至500稀释500X DMSO储备溶液(例如1到500的DMX储备溶液稀释到500 µL缓冲液)。涡旋混合均匀。注意:对于不同的细胞类型和/或实验条件,应根据经验确定染料工作溶液的最终浓度。建议以至少十倍以上的浓度进行测试。例如,CytoTell Red在某些细胞类型中使用的量可能要比建议的浓度少得多。

 

样品示例及操作

1.用测试化合物处理细胞所需的时间。

2.离心细胞以获得每管1-5×10 5个细胞。

3.在500 µL CytoTell 染料工作溶液中重悬细胞。可选:可以将500X DMSO储备溶液直接添加到细胞中而无需去除培养基(例如,将500 µL DMSO储备溶液添加到500 µL细胞中)

4.在室温或37°C下,将细胞与染料溶液孵育10至30分钟,避光。

5.从细胞中除去染料工作溶液,用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中,每管可得到1-5×10 5个细胞。

6.用流式细胞仪或荧光显微镜监测在Ex / Em(参见表1)下的荧光变化。

 

参考文献

Cooperation of innate immune cells during Hepatitis C virus infection
Authors: Volker Klöss
Journal: (2017)

CXCL12--CXCR4 Axis Is Required for Contact-Mediated Human B Lymphoid and Plasmacytoid Dendritic Cell Differentiation but Not T Lymphoid Generation
Authors: Hirohito Minami, Keiki Nagaharu, Yoshiki Nakamori, Kohshi Ohishi, Naoshi Shimojo, Yuki Kageyama, Takeshi Matsumoto, Yuka Sugimoto, Isao Tawara, Masahiro Masuya
Journal: The Journal of Immunology (2017): ji1700054

Interaction and Mutual Activation of Different Innate Immune Cells Is Necessary to Kill and Clear Hepatitis C Virus-Infected Cells
Authors: Volker Klöss, Oliver Grünvogel, Guido Wabnitz, Tatjana Eigenbrod, Stefanie Ehrhardt, Felix Lasitschka, Volker Lohmann, Alexander H Dalpke
Journal: Frontiers in Immunology (2017): 1238

Onionin A inhibits ovarian cancer progression by suppressing cancer cell proliferation and the protumour function of macrophages
Authors: Junko Tsuboki, Yukio Fujiwara, Hasita Horlad, Daisuke Shiraishi, Toshihiro Nohara, Shingo Tayama, Takeshi Motohara, Yoichi Saito, Tsuyoshi Ikeda, Kiyomi Takaishi
Journal: Scientific Reports (2016)

Multiplexing analysis of cell proliferation and cellular functions using a new multicolor panel of fluorescent cell proliferation dyes (P1290)
Authors: Jinfang Liao, Qin Zhao, Yibo Wu, Zhenjun Diwu
Journal: The Journal of Immunology (2013): 119--4

 

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产品名称 货号
活细胞染色 CytoTell 蓝色 Cat#22251
活细胞染色 CytoTell 绿色 Cat#22253
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说明书
活细胞染色 CytoTell 绿色.pdf