橙色荧光示踪探针 CytoTrace CMTMR

货号22014存储条件f/l
规格10x50 ug价格2460
Ex (nm)541Em (nm)565
分子量554.04溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

      CytoTrace 橙色CMTMR在化学上与CellTracker 橙色CMTMR相同。CytoTrace Orange CMTMR可以自由地穿过细胞膜进入细胞,然后转化为不渗透细胞膜的反应产物。CytoTrace Orange CMTMR染料可以在活细胞中保留数代。染料转移到子细胞中,但不转移到种群中的相邻细胞中。CytoTrace 橙色CMTMR染料旨在显示至少72小时的荧光,并且该染料具有理想的跟踪特性。CMTMR染料稳定,在工作浓度下无毒,在细胞中保留良好,并且在生理pH下发出明亮的荧光。此外,CytoTrace 橙色CMTMR染料的激发和发射光谱与GFP(绿色荧光蛋白)已很好地分离,并且可以进行多重光谱。



产品说明书

操作步骤

该协议仅提供指南,应根据您的特定需求进行修改。

1.准备2-10 mMDMSO储备溶液

对于#22014添加45微升DMSO成50 μ 克小瓶使2mM的储备溶液(1毫克/毫升,相当于1.8毫摩尔);

对于#22015添加36微升DMSO成50 μ 克小瓶制成10mM储备溶液(1毫克/毫升,相当于1.46毫摩尔);

对于#22016,添加153 uL ml DMSO以制成10 mM储备溶液(1 mg / ml相当于1.53 mM);

对于#22017,添加215μLDMSO以制成10 mM储备溶液(1 mg / ml相当于2.15 mM);

对于#22020,将4.2 mg溶于1 ml DMSO中制成10 mM储备溶液(1 mg / ml相当于〜2.4 mM);

注意:储备溶液应及时使用;应将所有剩余的溶液等分并在< -20 o C下冷冻。避免重复冻融循环,并避光

2.准备染料工作液

在使用前,通过用Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的pH 7缓冲液稀释步骤1中的DMSO储备溶液,准备好1至20 µM的染料工作溶液。

3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞:

3.1用测试化合物处理细胞所需的时间。

3.2离心细胞,每管得到2-10 x105细胞。

3.3将细胞重悬于500 µL 的染料工作溶液中(来自步骤2)。

3.4将细胞与染料溶液在室温或37° C下避光放置15至30分钟。

3.5从细胞中除去染料工作溶液,用HHBS或您选择的缓冲液洗涤细胞。将细胞重悬于500 µL预热的HHBS或培养基中,每管可得到2-10 x 10 5个细胞。

3.6用流式细胞仪(FL1通道) 或荧光显微镜监测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光变化。

注意:对于细菌细胞染色:将母液在通过测试细菌过夜生长而预先调节的营养肉汤中以1:800的比例稀释时,染色是最有效的,但是也可以使用新鲜的营养肉汤或PBS。细菌悬浮液应用PBS稀释至105 - 10 7每毫升。将1 ml溶液加到.45 µm过滤器(25mm)上并真空过滤除去溶液,然后加入1ml染料溶液并在室温下孵育5-10分钟,即可对细菌染色。

 

参考文献

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说明书
橙色荧光示踪探针 CytoTrace CMTMR.pdf