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DAX-J2 比率 580/460 一氧化氮NO荧光探针

英文名称:DAX-J2™ Ratio 580/460
产品参数
Ex (nm)404Em (nm)468
分子量830.97溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

DAX-J2 比率 580/460 一氧化氮NO荧光探针是美国AAT Bioquest生产的检测一氧化氮的试剂,DAX-J2 Ratio 580/460是近由AAT Bioquest开发的新型一氧化氮(NO)传感器。它是一种细胞渗透性试剂,可以在生理条件下以比率模式测量活细胞中的游离NO和一氧化氮合酶(NOS)活性。一旦进入细胞内,就释放DAX-J2试剂上的阻断基团,以在NO氧化时诱导波长为580和460nm的荧光比率变化。可以使用Cy3®/ TRITC和BD Horizo​​n V450 / Pacific Blue的过滤器组检测580 nm和460 nm的荧光强度。这两个过滤器组配备了大多数流式细胞仪和荧光显微镜。与常用的DAF-2 NO探针相比,DAX-J2 Ratio 580/460具有明显的NO检测优势:1)NO检测不需要酯酶活性。 DAF-2需要细胞内酯酶切割其乙酸酯基团以检测NO活性。这种酯酶依赖性常常使NO检测复杂化,因为酯活性受细胞健康和许多其他因素的影响。 2)DAX-J2产品表现出不依赖于pH的荧光,而DAF-2的荧光受pH的影响很大。 3)DAX-J2 Ratio 580/460可以采用比例模式进行监控。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的DAX-J2 比率 580/460 一氧化氮NO荧光探针。

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实验方案

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备5至10 mM DAX-J2 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成1至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞。

3)在37℃下,将细胞与1-10 µM(来自步骤1),DAX-J2 橙色(目录号16300),红色(目录号16301)或比率580/460(目录号16310)孵育20 -60分钟。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)使用底部读取模式的适当荧光仪器分析细胞。

 

参考文献

Nitric oxide upregulates microglia phagocytosis and increases transient receptor potential vanilloid type 2 channel expression on the plasma membrane
Authors: Matthew JE Maksoud, Vasiliki Tellios, Dong An, Yun-Yan Xiang, Wei-Yang Lu
Journal: Glia (2019)

Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44--48

Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) Is a Novel Negative Regulator of Hematopoietic Stem/Progenitor Cell Trafficking
Authors: Mateusz Adamiak, Ahmed Abdelbaset-Ismail, Joseph B Moore, J Zhao, Ahmed Abdel-Latif, Marcin Wysoczynski, Mariusz Z Ratajczak
Journal: Stem Cell Reviews and Reports (2016): 1--12