钙离子荧光探针Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*

货号20550存储条件f/l
规格1 mg价格3720
Ex (nm)495Em (nm)528
分子量1096.95溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

        钙离子荧光探针Fluo-4 AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体(GPCR)的药物发现中的优选方法。 我们的Fluo-4®和Rhod-4 系列钙检测试剂是最亮的绿色和红色钙指示剂,而我们的Cal-520 和Cal-590 具有最高的细胞内钙检测信号/背景比。AAT Bioquest以最高质量提供其他钙指标,如Fluo-4,Fluo-3,Fura-2,Indo-1,Rhod-5N和Rhod-2 AM。百萤生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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产品说明书

使用钙指示剂AM酯类

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞:

AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

a)在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b)在实验当天,将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.04%Pluronic®F-127在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备2至20μM的工作溶液。 对于大多数细胞系,我们建议钙指示剂的最终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影,建议使用可产生足够信号强度的最小探针浓度。

注意:非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加钙指示剂AM酯的水溶性。

c)如果您的细胞(如CHO细胞)含有有机阴离子转运蛋白,可以将丙磺舒(2-5 mM)或磺吡酮(0.2-0.5 mM)添加到染料工作溶液中(最终浓度为1) 丙磺舒为-2.5 mM,对于磺吡酮为0.1-0.25 mM,以减少去酯化指标的泄漏。

d)将等体积的染料工作溶液(来自步骤b或c)加入细胞板中。

e)将染料加载板室在温度或37℃下孵育20分钟(特别是Fluo-8AM)至2小时,然后将板在室温下再孵育30分钟。

注意1:降低加载温度可能会减少指示符的划分。

注意2:孵育Cal-520 AM超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度

f)用HHBS或您选择的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如1mM丙磺舒,如果适用)替换染料工作溶液,以去除多余的探针。

g)在所需的Ex / Em波长下进行实验(见说明书)。

 

试剂应用文献

14,15‐epoxyeicosatrienoic acid produced by cytochrome P450s enhances neurite outgrowth of PC12 and rat hippocampal neuronal cells
Authors: 
Oguro, Ami and Inoue, Takumi and Kudoh, Suguru N and Imaoka, Susumu
Journal: 
Pharmacology Research & Perspectives (2018): e00428

 

参考文献

14, 15-epoxyeicosatrienoic acid produced by cytochrome P450s enhances neurite outgrowth of PC 12 and rat hippocampal neuronal cells
Authors: Ami Oguro, Takumi Inoue, Suguru N Kudoh, Susumu Imaoka
Journal: Pharmacology Research & Perspectives (2018): e00428

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说明书
钙离子荧光探针Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*.pdf