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蛋白酶荧光底物Gly-Pro-AMC CAS 115035-46-6

英文名称:Gly-Pro-AMC *CAS 115035-46-6*
产品参数
Ex (nm)341Em (nm)441
分子量443.37溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

蛋白酶荧光底物Gly-Pro-AMC是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,Gly-Pro-AMC是用于检测二肽酰多肽酶IV (DPPIV)的高灵敏度荧光底物,一种丝氨酸蛋白酶,能够从倒数第二位上是L-脯氨酸或者L-丙氨酸的多肽上剪切其N末端的二肽酰。DPPIV是表达于多种细胞(包括上皮细胞,内皮细胞和淋巴细胞)表面的多功能蛋白质。它与T细胞活化抗原CD26和腺嘌呤核苷脱氨基酶(腺苷脱氨酶)结合蛋白具有同一性,它以可溶性状态释放于血浆中。CD26/DPPIV的底物包括多种含有脯氨酸的多肽,例如生长因子、趋化因子、神经肽和血管活性肽。DPPIV参与免疫调控,信号转导和细胞凋亡,并且在肿瘤的发展中发挥重要作用。重要的是,DPPIV是II型糖尿病的靶点,由于其作为血清蛋白酶,能够剪切多肽胰高血糖素家族中肠降血糖素,以此调节体内葡糖糖的稳定。研究显示一种DPPIV抑制剂可以增强葡糖糖衰减的耐受力。用带有Gly-Pro-AMC的DPPIV检测是一种简单、快速,灵活的检测法,是理想的高通量筛选方法。与DPPIV检测法相比,这种检测法增强了检测灵敏度,使研究者可以用更少的酶,同时获得恰当的Z值。这种单一性的酶偶联形式使用非常方便,只需要在检测样品中添加一种单一的试剂;在20inm内可以获得大感光值,并且其单一产物非常稳定。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶荧光底物Gly-Pro-AMC。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 380nm
Em: 500nm
Cutoff: 435nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Gly-Pro-AMC:
在DMSO中制成10至25 mM的Gly-Pro-AMC储备溶液,避光。 注意:储备溶液应及时使用; 应将所有未使用的溶液等分,并在-20℃冷冻。注意:避免重复冻融循环,并避免光照。

 

2.工作溶液

Gly-Pro-AMC:
取出一个小瓶,并用您选择的测定缓冲液(例如50 mM Tris-HCl,pH 7.5,1.0 mM DTT)稀释储备溶液,制成50至100 µM测定溶液。

 

样品操作及分析

1.将等体积的DPPIV标准品或样品与测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

2.在Ex / Em = 380/500 nm处监测荧光增加。

 

参考文献

Effects of activated carbon N-acetylcysteine sustained-release microcapsule on dipeptidyl peptidase IV expression in young rats with non-alcoholic fatty liver disease
Authors: Hongping Zhou, Tingting Shi, Jun Yan, Xiaojin Chen, Li Liao, Shiyong Zhao, Hongying Fang, Rangxiao Zhuang
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2017): 4737--4744