Cyber Green 20X水溶液PCR定量

产品货期

咨询

产品优势

SYBR® Green I 等效染料：其化学性质与 Thermo Fisher 公司的 SYBR® Green I 完全一致，光谱特征相同（激发/发射波长：498/522 nm），可直接替代原有实验方案。

多功能 DNA 检测能力：作为荧光嵌入型染料，该染料与双链 DNA 结合后产生高强度荧光，适用于凝胶电泳和实时荧光定量 PCR 等多种应用场景。

标准仪器兼容性：可被 488 nm 激光线优化激发，并可通过 FITC 通道检测，与常规荧光显微镜和流式细胞仪完美兼容。

安全性高：相比EtBr，其细胞渗透性更低，有效降低致突变风险；同时绿色激发光避免了使用UV光源

适用范围

用于凝胶电泳和定量PCR（qPCR）实验中的双链DNA（dsDNA）检测。

产品介绍

SYBR® Green I（(Thermo Fisher Scientific)）与Helixyte™ Green是化学等效的核酸荧光染料，其激发峰为498 nm，发射峰为522 nm。该染料适用于凝胶电泳和定量PCR（qPCR）实验中的双链DNA（dsDNA）检测。

Helixyte™ Green属于花菁染料家族，是一种可嵌入核酸的荧光染料。其具有荧光增强特性：与双链DNA的小沟结合后荧光强度显著升高，与单链DNA（ssDNA）及RNA结合时荧光增强效果较弱。在电泳实验中，该染料可用于聚丙烯酰胺凝胶和琼脂糖凝胶中的双链DNA染色。它同样适用于qPCR进程监测，在退火或延伸阶段测得的荧光强度与PCR产物量成正比。在这些应用中，染料通常与预混液配套提供。

Helixyte™ Green和SYBR Green染料原则上比EtBr更安全且致突变性更低，因为它们的细胞渗透性较弱。此外，这类染料的激发波长位于绿色光区，与荧光显微镜的FITC通道、流式细胞仪的488 nm激光器等常用实验仪器兼容，因此操作更为便捷。而EtBr则需要危险性更高的紫外光进行激发。

SYBR Green I对双链DNA具有强亲和力，而SYBR Green II则对RNA具有强亲和力。

染色方案

建议将以下方案用于非热启动Taq酶。

1.设置PCR反应如下：

5μL不含Mg⁺²的10倍的聚合酶缓冲液

2.5μL50mMMgCl₂

每种5mM的2mM dNTP

2.5μL20XCyber Green

1-5单位的Taq DNA聚合酶

每种引物0.1-1μM（最终浓度）

双蒸水至终体积为50μL。

2.在热循环荧光计上进行实时PCR，并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

注意：使用ABI序列检测系统时，请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。