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Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒

英文名称:Helixyte™ Green Fluorimetric dsDNA Quantitation Kit *High Sensitivity*
产品参数
Ex (nm)502Em (nm)522
分子量-溶剂-
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于DNA定量的试剂盒,Helixyte 绿色dsDNA定量测定试剂盒可用于在ssDNA,RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性地检测低至25 pg / ml的dsDNA。 Helixyte Green与dsDNA结合后显示出较大的荧光增强。 该测定法在三个数量级上是线性的,并且几乎没有序列依赖性,使您能够准确地测量来自多种来源的DNA,包括基因组DNA,病毒DNA,微量制备DNA或PCR扩增产物。 Helixyte 绿色dsDNA定量分析试剂盒比紫外吸收读数的灵敏度高几个数量级。 在等摩尔量的RNA存在下,它对dsDNA具有特异性。 该套件具有混合和读取格式的强大功能。 它可以与台式荧光计或手持式荧光计(例如Qubit荧光计)一起使用。 该试剂盒是Quant-iT PicoGreen®dsDNA分析试剂盒(Quant-iT 和PicoGreen®是Invitrogen的商标)的替代品。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒。

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适用仪器


分光光度计  
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
实验方案

样品实验方案

简要概述

向每个比色皿中添加1mL dsDNA标准液或测试样品
加入1mL Helixyte Green 工作溶液
在室温下孵育5-10分钟
监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光

 

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1分析缓冲液(1X)
用无菌,蒸馏,无DNase的水将浓缩的缓冲液稀释20倍,从而制备1X检测缓冲液。

2.标准溶液

dsDNA标准
对于高范围标准曲线:
将30 µL 100 µg / mL dsDNA储备溶液(组分C)添加到1.47 mL的1X分析缓冲液中以得到2000 ng / mL dsDNA溶液,然后进行1:2和1:10连续稀释以获得1000、100、10 ,1和0 ng / mL。

对于低范围标准曲线:
将40 µL 2 µg / mL dsDNA储备液添加到1.56 mL 1X分析缓冲液中,以得到50 ng / mL dsDNA溶液,然后以1:2和1:10连续稀释以获得25、2.5、0.25、0.025和0 ng / mL。

3.工作溶液

通过在1X分析缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备Helixyte Green 工作溶液。 例如,要准备足够的工作溶液以测定2 mL终体积中的10个样品,请将50μLHelixyte Green (组分A)添加到10 mL分析缓冲液(组分B)中。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得佳结果,该溶液应在准备后的几个小时内使用。

 

样品示例及操作

1.向每个装有1 mL dsDNA标准品,空白对照和测试样品的比色皿中加入1 mL Helixyte Green 工作溶液,以使dsDNA测定总体积为2 mL /比色皿。

2.在避光条件下,于室温下孵育反应5至10分钟。

3.使用分光光度计在Ex / Em = 490/525 nm处监视荧光的增加。 注意:为使光漂白效应小化,请对所有样品保持恒定的荧光测量时间。

 

参考文献

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Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
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Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain "PicoGreen"
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Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
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产品名称 货号
Helixyte Green 双链DNA荧光定量试剂盒 适合酶标仪检测检测 Cat#17650