Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒
| Ex (nm) | 503 | Em (nm) | 527 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品介绍
DNA定量是在各类分析中对DNA样品进行制备时一项非常重要的任务。Helixyte™ Green 荧光法 dsDNA 定量试剂盒提供了一种使用 Helixyte™ Green BR 对 dsDNA 进行快速定量的方法。该检测方法在三个数量级范围内呈线性，且灵敏度比紫外吸光度读数高出数个数量级。
Helixyte™ Green BR 在与 dsDNA 结合后表现出显著的荧光增强，且序列依赖性小，能够准确定量来自多种来源的 DNA 样品，包括基因组 DNA、病毒 DNA、质粒小提 DNA 或 PCR 扩增产物。该检测方法对双链 DNA（dsDNA）具有高度选择性（相对于 RNA），并经过优化，可测量 10 pg/µL 至 10 ng/µL 范围内的 DNA 浓度
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 530 nm |
| Cutoff： | 510 nm |
| 推荐孔板: | 纯黑色孔板 |
样品实验方案
简要概述
- 准备dSDNA标准品，测试样品和染料工作溶液
- 添加DNA标准液或测试样品（50 uL）
- 添加Helixyte Green-BR工作溶液（50 uL）
- 在室温下孵育2分钟
- 检测Ex / Em = 490/530 nm的荧光强度
提示：操作前将所有组件加热到室温。暂时没有关于Helixyte Green dsDNA染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合，因此应将其视为潜在的诱变剂，应谨慎处理。DMSO储备溶液应特别小心，因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。
溶液配制
标准溶液配制
将100 uL的100 ug / mL dsDNA标准溶液（组分C）添加到400 uL的测定缓冲液（组分B）中，以生成20 ug / mL的dsDNA标准溶液。然后用测定缓冲液（组分B）进行1：3的系列稀释，以得到0至20 ug / mL的系列稀释的dsDNA标准品。
工作溶液配制
Helixyte Green BR工作溶液：将50 uL Helixyte Green BR（组分A）添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，使总体积为5.050 mL。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意：我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备该溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。为了获得结果，应在准备后的几个小时内使用此溶液。
实验步骤
表1. 在透明底部96孔微孔板中的dsDNA标准品和测试样品的布局。DS = dsDNA标准品（DS1-DS7，20至0.027 ug / mL）; BL =空白对照；TS =测试样品
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BL |
BL |
TS |
TS |
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DS1 |
DS1 |
… |
… |
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DS2 |
DS2 |
… |
… |
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DS3 |
DS3 |
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DS4 |
DS4 |
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DS5 |
DS5 |
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DS6 |
DS6 |
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DS7 |
DS7 |
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表2. 每个孔的试剂组成
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Well |
Volume |
Reagent |
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DS1-DS7 |
50 uL |
连续稀释 (20 to 0.027 ug/mL) |
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BL |
50 uL |
缓冲液 (Component B) |
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TS |
50 uL |
实验样品 |
- 根据表1和表2提供的布局，制备dsDNA标准品（DS）、空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 uL试剂，而不是50 uL。注：根据需要处理细胞或组织样本。
- 添加50 uL Helixyte Green-BR染料工作液（2X）分别加入dsDNA标准液、空白对照液和供试品中，使总分析体积为100ul/孔。对于384孔板，添加25 uL的Helixyte Green-BR染料工作溶液，每孔总体积为50 uL/孔。
- 在室温下避光培养2分钟。
- 在Ex/Em=490/530 nm（截止=515nm）处用荧光酶标仪检测荧光强度。
试剂应用文献
