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iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物

英文名称:iFluor® 647-Concanavalin A Conjugate
iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物
价格 1298
产品规格
1 mg

产品货号
产品参数
Ex (nm)656Em (nm)670
分子量N/A溶剂Water
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

刀豆蛋白A(ConA)是一种凝集素,它与各种糖、糖蛋白和糖脂中的某些结构特异结合。Con A是一种T细胞有丝分裂原,募集淋巴细胞并诱导细胞因子的产生。除了有丝分裂活性外,ConA还可以通过线粒体介导的细胞凋亡和自噬诱导细胞程序性死亡。ConA还被报道NFAT(活化T细胞的核因子),NFAT是一个转录因子家族,在免疫系统的发育和功能中起重要作用,包括T细胞受体(TCR)的参与。ConA广泛应用于生物学和生物化学中,用来表征细胞表面的糖蛋白和其他含糖物质。还可用于凝集素亲和层析纯化糖基化大分子,以及研究各种免疫细胞的免疫调节作用。ConA在B-聚糖分支结构的末端位置特异性地结合α-D-甘露糖基和α-D-葡萄糖基残基(仅在碳2上的醇中不同的两个己糖)。它有4个结合位点,对应于4个亚单位。刀豆蛋白A(conA)是细胞生物学中应用广泛的凝集素之一。iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物选择性地结合到A-甘露吡喃糖基和A-葡萄糖吡喃糖基残基上,发出明亮的红色荧光。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 647-刀豆蛋白A(ConA)缀合物。

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适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy5 滤波片组
Em: Cy5 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

储备溶液配制

iFluor 647-刀豆蛋白 A 原液(200X)

在产品瓶中加入 500 μL 的 ddH2O,制成 2 mg/mL 原液

注:重构的偶联物溶液可在 2-8 °C 下短期保存或在 -20 °C 下长期保存

 

工作溶液配制

iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液(1X)

将 5 μL 的 200X 储备液添加到 1 mL HHBS 缓冲液中

注:不同细胞系的优化染色浓度可能不同。推荐的活细胞起始浓度为 5-10 μg/mL

 

操作步骤

活细胞染色

1.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

2.添加 100 µL iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液。

3.用刀豆蛋白 A 结合物工作溶液在 37 °C 下孵育细胞 10-30 分钟。

4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5.使用 Cy5 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

固定细胞染色

1.在 PBS 中用 4% 甲醛固定细胞。

注:对于固定细胞膜染色,建议在没有透化步骤的情况下进行染色。固定后的透化步骤会导致细胞内隔室染色,例如高尔基体和内质网 (ER) 结构。

2.添加 100 µL iFluor 647-刀豆蛋白 A 工作溶液。

3.将细胞与刀豆蛋白 A 工作溶液在室温下孵育 10-30 分钟。

4.用 HHBS 缓冲液清洗细胞两次。

5.使用 Cy5 滤光片组在荧光显微镜上成像细胞。

 

参考文献

Short-term high-fat diet intake leads to exacerbation of concanavalin A-induced liver injury through the induction of procoagulation state.
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Mycophenolate mofetil attenuates concanavalin A-induced acute liver injury through modulation of TLR4/NF-κB and Nrf2/HO-1 pathways.
Authors: Serrya, Marwa S and Zaghloul, Marwa S
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