JJ Green核酸染料

货号TJ1704存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格500 ul价格500
Ex (nm)497Em (nm)520
分子量溶剂DMSO
产品详细介绍


简要概述

JJ Green是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下,JJ Green发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,JJ Green的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。JJ Green的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。

 

JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。JJ Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用JJ Green染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。可适用于多种电泳分析。

JJ Green 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳,和毛细管电泳等。

JJ Green 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,JJ Green 与EB相比,诱变能力大大降低。

JJ Green 核酸凝胶染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,JJ Green 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经JJ Green 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比,没有背景荧光。为获得最佳的结果,凝胶最好在跑胶后再进行染色。JJ Green 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物,凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于:DNA和RNA的检测;SSCP及异源双链分析。



产品说明书

实验方案

1.JJ Green预染方法

1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

1.2工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的JJ Green稀释10000倍,即为JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

1.3制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。

1.4样品染色:向分析样品中加入JJ Green工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使JJ Green与样品中DNA充分结合。JJ Green工作液加入量为总上样量的1/10。

1.5DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使JJ Green与DNA充分结合。

1.6上样、电泳:按常规操作。

 

2.JJ Green后染方法

2.1按照常规方法进行电泳。

2.2用PH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照3300:1的比例稀释JJ Green浓缩液,混匀,制成3X染色溶液。

2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

2.4用蓝光透照仪观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝光透照仪内观测。

 

3.JJ Green使用注意事项

3.1在"JJ Green预染色方法"中,电泳时间不要超过2小时,否则JJ Green会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。

3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中,JJ Green 可以全部从双链核酸上去掉。

3.3如果想对用 JJ Green 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 JJ Green 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

3.4JJ Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。