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钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM

英文名称:Mag-Fluo-4 AM
产品参数
Ex (nm)495Em (nm)528
分子量817.65溶剂DMSO
存储条件在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

关键参数


仪器:荧光酶标仪
Ex:490
Em:525
Cutoff:515
推荐纯黑色孔板

 

仪器:荧光显微镜
通道:FITC
推荐黑色透明底孔板

 

仪器:流式细胞仪
通道:FITC

 

钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,细胞渗透性Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM的类似物,Mg离子的Kd为4.7 mM,Ca离子的Kd为22μM,因此可用作细胞内Mg离子指示剂以及 低亲和力Ca离子指示剂。 这种低亲和力荧光Ca离子指示剂已被用于准确跟踪骨骼肌中空间平均游离Ca离子瞬态的动力学。 Mag-fluo-4产生关于骨骼肌中空间平均游离Ca离子瞬态的可靠动力学信息。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM。 

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钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM加载到活细胞中的方案(点击查看)

钙离子篇:时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Mag-Fluo-4 AM储备液
2.1使用的Mag-Fluo-4 AM量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Mag-Fluo-4AM与611.51μL无水DMSO混合。

 

3.使用10μMMag-Fluo-4 AM 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1终孔内浓度的Mag-Fluo-4 AM:5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Mag-Fluo-4AM。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL
注意:对于大多数细胞系,我们建议Mag-Fluo-4 AM的终浓度为4至5μM


4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的终浓度调节至5μM的Mag-Fluo-4 AM

 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液,直至体积为4 mL
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。

 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 494/516 nm运行实验。

 

参考文献

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Sevoflurane protects ventricular myocytes from Ca2+ paradox-mediated Ca2+ overload by blocking the activation of transient receptor potential canonical channels
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