Portelite 荧光法DNA 定量试剂盒*检测限更广* *适用于 Cytocite 和 Qubit 荧光仪*

货号17665存储条件 Multiple
规格100 Tests价格984
Ex (nm)Em (nm)
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

在进行各种分析的DNA样品制备中,DNA定量是一项非常重要的任务。 Portelite 荧光DNA定量试剂盒提供了使用Qubit荧光仪操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它针对Cytocite 和Qubit 荧光仪进行了优化。 Portelite 荧光DNA定量测定在三个数量级上呈线性。该测定法对RNA上的双链DNA(dsDNA)具有高度选择性,并针对测量10 pg / µL至10 ng / µL的dsDNA浓度进行了优化。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后表现出较大的荧光增强,并且比UV吸光度读数高几个数量级。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。

 

适用仪器


Qubit 荧光计  
激发: 480nm
发射: 530nm
器材: 0.2 mL PCR小瓶
CytoCite 荧光计  
激发: 480nm
发射: 530nm
器材: 0.2 mL PCR小瓶


产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备Helixyte Green BR工作溶液
  2. 在每个0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液
  3. 在每个试管中添加10 uL DNA标准溶液或测试样品
  4. 在室温下孵育2分钟
  5. 使用CytoCite 荧光仪或Qubit 检测荧光

注意:打开之前,请将所有成分置于室温下。

 

溶液配制

工作溶液配制

Helixyte Green-BR工作溶液:在DNA分析缓冲液(组分B)中稀释200倍Portelite dsDNA试剂(组分A)。 例如,要为8个样品准备足够的工作溶液,请将5uL Helixyte Green BR(组分A)添加到1mL DNA分析缓冲液(组分B)中。注意:通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作液免受光照。 我们建议在塑料容器中操作而不是玻璃中制备该溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得最佳结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。

 

实验步骤

根据DNA样品的估计浓度,样品量可以在1〜20 uL的范围内。推荐的样品量为10 uL,DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内。如果使用其他样品体积,请在浓度计算中调整稀释倍数。

10 uL样品体积(DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内)实验方案。

  1. 在每个Cytocite 样品管(#CCT100)或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意:请使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管,例如#CCT100。
  2. 向每个试管中加入10 µL DNA标准品或测试样品,然后离心2〜3秒进行混合。
  3. 将所有试管在室温下孵育2分钟。
  4. 将样品插入CytoCite 或Quibit 中,并通过绿色荧光通道检测荧光。若使用CytoCite,请遵循适用于CytoCite 荧光仪的程序。

标准校准曲线的准备

对于Portelite 分析,您可以选择使用DNA标准液绘制校正曲线。

  1. 在DNA分析缓冲液(成分B)中,用100 ng/uL的DNA标准BR#2(成分D)进行1/3系列稀释,得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA标准稀释液。
  2. 在每个试管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。
  3. 将10 uL标准液或10 uL样品添加到0.2 mL PCR管中。
  4. 将反应在室温下孵育2分钟。
  5. 将样品插入CytoCite ,并通过绿色荧光通道检测荧光。

 

图示

 

图1.使用具有宽动态范围的Portelite 荧光DNA定量试剂盒生成的DNA标准曲线。 使用绿色荧光通道定量荧光强度,使用线性拟合计算回归模型。

 

参考文献

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