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Portelite™ 双链DNA定量试剂盒(荧光高灵敏度)针对CytoCite 和Qubit 荧光分析仪进行了优化

英文名称:Portelite™ Fluorimetric High Sensitivity DNA Quantitation Kit *Optimized for CytoCite™ and Qubit™ Fluorometers*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

超灵敏检测可准确测量初始浓度低至1.25 pg/μL、高至100 ng/μL的样本

 

适用范围

双链DNA(dsDNA)定量

 

产品介绍

DNA定量是各类基因组分析中DNA样本制备的关键环节。Portelite™ 双链DNA定量试剂盒提供了一种快速方法,可通过Helixyte™ Green荧光探针结合手持式荧光计对双链DNA进行定量。该试剂盒专为Cytocite™和Qubit™荧光计优化,其定量检测线性范围跨越五个数量级。

本检测方法对双链DNA(dsDNA)具有高选择性,可准确测量初始浓度低至1.25 pg/μL、高至100 ng/μL的样本。Helixyte™ Green探针与dsDNA结合后荧光信号显著增强,其灵敏度较紫外吸光度读数高出数个数量级。

 

适用仪器


量子位荧光计  
Ex: 480 nm
Em: 520 nm 
规格: 0.2 mL PCR 小瓶

 


CytoCite 荧光计

Ex: 480 nm
Em: 520 nm
规格: 0.2 mL PCR小瓶
实验方案

操作步骤

简要概述

准备Helixyte 绿色工作溶液

在每个0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液(Cat#:CCT100

将10μLDNA标准品或测试样品加入每个试管中

在室温下孵育2分钟

使用CytoCite 荧光分析仪或Qubit 荧光分析仪监测荧光

 

溶液制备

Helixyte Green 工作溶液制备:
为10个样品制备足够的工作溶液,将10μL Helixyte Green (组分A)加入2 mL DNA分析缓冲液(组分B)中。

注意:用铝箔覆盖或将其置于黑暗中,以保护工作溶液免受光照。

注意:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为展现合适的效果,该溶液应在其制备后几小时内使用。

 

样品实验方案

样品体积是1~20μL(取决于DNA样品的估计浓度)。推荐样品体积为10μL,DNA浓度范围为0.5~10 ng /μL。如果使用其他样品量,请在浓度计算中调整稀释倍数。

1.基于10μL样品体积生成以下方案,DNA浓度在0.5~10 ng /μL范围内。

1.1在每个Cytocite 样品管(#CCT100)或等效的0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液注意:使用薄壁聚丙烯,透明的0.2 mL PCR管,如#CCT100。

1.2将DNA标准品或测试样品10μL加入每个试管中,然后涡旋混合2~3秒。

1.3让所有试管在室温下孵育2分钟。

1.4将样品插入CytoCite 或Quibit ,并用绿色荧光通道监测荧光。按照适用于CytoCite 荧光分析仪的步骤进行操作。详细说明请点击查看

 

2.标准校准曲线的制备

 对于Portelite 分析,您可以选择使用DNA标准制作校准曲线。 以下是生成定制DNA标准曲线的简要方案:

2.1用DNA Assay Buffer进行稀释,得到10,8,6,4,2,1,0.5,0 ng /μLDNA标准稀释液。

2.2将190μLHelixyteGreen 工作溶液加入0.2 mL PCR管中。

2.3每管加入10μL标准品或10μL样品。

2.4在室温下孵育反应2分钟。

2.5将样品插入CytoCite 并用绿色荧光通道检测荧光。

 

试剂应用文献

View all 2 citations: Citation Explorer
Abelmoschi Corolla polysaccharides and related metabolite ameliorates colitis via modulating gut microbiota and regulating the FXR/STAT3 signaling pathway
Authors: 
He, Linhai and Chen, Kaidi and Chen, Zepeng and Chen, Chen and Zhou, Jin and Shao, Yifan and Ma, Jiaze and Qiu, Zhengxi and Chen, Yugen and Zhang, Wei
Journal: 
International Journal of Biological Macromolecules (2024): 134370
 
Hydrogen-rich water alleviates constipation by attenuating oxidative stress through the sirtuin1/nuclear factor-erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase-1 signaling pathway
Authors: 
Chen, Kai-Di and Wang, Kui-Ling and Chen, Chen and Zhu, Yi-Jia and Tang, Wen-Wen and Wang, Yu-Ji and Chen, Ze-Peng and He, Lin-Hai and Chen, Yu-Gen and Zhang, Wei
Journal: 
World Journal of Gastroenterology (2024): 2709--2725