DNA定量试剂盒(荧光高灵敏度)针对CytoCite 和Qubit 荧光分析仪进行了优化

货号17660存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格100 Tests价格984
Ex (nm)501Em (nm)520
分子量溶剂
产品详细介绍


简要概述

DNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于定量DNA的试剂盒,DNA定量是用于各种基因组分析的DNA样品制备中非常重要的。 这种Portelite dsDNA定量试剂盒提供了一种使用手持式荧光分析仪使用Helixyte Green探针定量dsDNA的快速方法。 它针对Cytocite 和Qubit 荧光计进行了优化。 Portelite dsDNA定量分析线性超过五个数量级。 该测定法对RNA上的双链DNA(dsDNA)具有高度选择性,并且设计为对于25pg / uL至100ng / uL的初始样品浓度是准确的。 Helixyte Green在与dsDNA结合后表现出大的荧光增强,并且比UV吸光度读数更敏感。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的DNA定量试剂盒。 

 

适用仪器


Qubit 荧光计  
激发: 488nm
发射: 520nm
器材: 0.2 mL薄壁PCR管
CytoCite 荧光计  
激发: 488nm
发射: 520nm
器材: 0.2 mL薄壁PCR管


产品说明书

操作步骤

简要概述

准备Helixyte 绿色工作溶液
在每个0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液(Cat#:CCT100
将10μLDNA标准品或测试样品加入每个试管中
在室温下孵育2分钟
使用CytoCite 荧光分析仪或Qubit 荧光分析仪监测荧光

 

溶液制备

Helixyte Green 工作溶液制备:
为10个样品制备足够的工作溶液,将10μL Helixyte Green (组分A)加入2 mL DNA分析缓冲液(组分B)中。 注意:用铝箔覆盖或将其置于黑暗中,以保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为获得最佳效果,该溶液应在其制备后几小时内使用。

 

样品实验方案

        样品体积是1~20μL(取决于DNA样品的估计浓度)。推荐样品体积为10μL,DNA浓度范围为0.5~10 ng /μL。如果使用其他样品量,请在浓度计算中调整稀释倍数。

1.基于10μL样品体积生成以下方案,DNA浓度在0.5~10 ng /μL范围内。

1.1在每个Cytocite 样品管(#CCT100)或等效的0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液注意:使用薄壁聚丙烯,透明的0.2 mL PCR管,如#CCT100。

1.2将DNA标准品或测试样品10μL加入每个试管中,然后涡旋混合2~3秒。

1.3让所有试管在室温下孵育2分钟。

1.4将样品插入CytoCite 或Quibit ,并用绿色荧光通道监测荧光。按照适用于CytoCite 荧光分析仪的步骤进行操作。详细说明请点击查看

 

2.标准校准曲线的制备

        对于Portelite 分析,您可以选择使用DNA标准制作校准曲线。 以下是生成定制DNA标准曲线的简要方案:

2.1用DNA Assay Buffer进行稀释,得到10,8,6,4,2,1,0.5,0 ng /μLDNA标准稀释液。

2.2将190μLHelixyteGreen 工作溶液加入0.2 mL PCR管中。

2.3每管加入10μL标准品或10μL样品。

2.4在室温下孵育反应2分钟。

2.5将样品插入CytoCite 并用绿色荧光通道检测荧光。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算浓度样本。 我们建议使用在线线性回归计算器(点击查看)

图1.使用Portelite 荧光DNA高灵敏度定量试剂盒生成的DNA标准曲线。 使用FITC通道定量荧光强度,使用log-log best-fit计算回归模型。 检测限为10 pg /μL。



说明书
DNA定量试剂盒(荧光高灵敏度)针对CytoCite 和Qubit 荧光分析仪进行了优化.pdf