Portelite™ 双链DNA定量试剂盒(荧光高灵敏度)针对CytoCite 和Qubit 荧光分析仪进行了优化
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产品货期
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产品优势
超灵敏检测:可准确测量初始浓度低至1.25 pg/μL、高至100 ng/μL的样本
适用范围
双链DNA(dsDNA)定量
产品介绍
DNA定量是各类基因组分析中DNA样本制备的关键环节。Portelite™ 双链DNA定量试剂盒提供了一种快速方法,可通过Helixyte™ Green荧光探针结合手持式荧光计对双链DNA进行定量。该试剂盒专为Cytocite™和Qubit™荧光计优化,其定量检测线性范围跨越五个数量级。
本检测方法对双链DNA(dsDNA)具有高选择性,可准确测量初始浓度低至1.25 pg/μL、高至100 ng/μL的样本。Helixyte™ Green探针与dsDNA结合后荧光信号显著增强,其灵敏度较紫外吸光度读数高出数个数量级。
适用仪器
量子位荧光计 | |
Ex: | 480 nm |
Em: | 520 nm |
规格: | 0.2 mL PCR 小瓶 |
CytoCite 荧光计 |
|
Ex: | 480 nm |
Em: | 520 nm |
规格: | 0.2 mL PCR小瓶 |
操作步骤
简要概述
准备Helixyte 绿色工作溶液
在每个0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液(Cat#:CCT100)
将10μLDNA标准品或测试样品加入每个试管中
在室温下孵育2分钟
使用CytoCite 荧光分析仪或Qubit 荧光分析仪监测荧光
溶液制备
Helixyte Green 工作溶液制备:
为10个样品制备足够的工作溶液,将10μL Helixyte Green (组分A)加入2 mL DNA分析缓冲液(组分B)中。
注意:用铝箔覆盖或将其置于黑暗中,以保护工作溶液免受光照。
注意:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为展现合适的效果,该溶液应在其制备后几小时内使用。
样品实验方案
样品体积是1~20μL(取决于DNA样品的估计浓度)。推荐样品体积为10μL,DNA浓度范围为0.5~10 ng /μL。如果使用其他样品量,请在浓度计算中调整稀释倍数。
1.基于10μL样品体积生成以下方案,DNA浓度在0.5~10 ng /μL范围内。
1.1在每个Cytocite 样品管(#CCT100)或等效的0.2 mL PCR管中加入190μL1XHelixyte Green 工作溶液注意:使用薄壁聚丙烯,透明的0.2 mL PCR管,如#CCT100。
1.2将DNA标准品或测试样品10μL加入每个试管中,然后涡旋混合2~3秒。
1.3让所有试管在室温下孵育2分钟。
1.4将样品插入CytoCite 或Quibit ,并用绿色荧光通道监测荧光。按照适用于CytoCite 荧光分析仪的步骤进行操作。详细说明请点击查看。
2.标准校准曲线的制备
对于Portelite 分析,您可以选择使用DNA标准制作校准曲线。 以下是生成定制DNA标准曲线的简要方案:
2.1用DNA Assay Buffer进行稀释,得到10,8,6,4,2,1,0.5,0 ng /μLDNA标准稀释液。
2.2将190μLHelixyteGreen 工作溶液加入0.2 mL PCR管中。
2.3每管加入10μL标准品或10μL样品。
2.4在室温下孵育反应2分钟。
2.5将样品插入CytoCite 并用绿色荧光通道检测荧光。
试剂应用文献