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百萤生物带您了解不一样的藻胆蛋白家族

 

        藻胆蛋白,是从微藻和蓝藻中提取的光合集光蛋白家族。这些蛋白质含有共价连接的线性四吡咯基团,称为藻胆素,在捕获光能方面起着关键作用。在微藻和蓝藻中,这些藻胆素吸收的能量通过荧光共振能量转移(FRET)有效地转移到叶绿素色素中,用于光合作用反应。由于藻胆蛋白在很宽的光谱范围内具有极高的荧光量子产率和吸光系数,因此在各种荧光应用(主要是流式细胞术)中作为有价值的荧光标记。与具有生物特异性的分子(例如免疫球蛋白,蛋白A或链霉抗生物素蛋白)缀合的藻胆蛋白是荧光激活细胞分选(FACS),组织化学,成像和免疫测定应用中的有效工具。

与有机和合成荧光染料相比,藻胆蛋白在用作荧光探针时具有以下几个优点:

  • 强烈的长波激发和发射曲线,以最大限度地减少生物材料的自发荧光。
  • 藻胆蛋白与蛋白质骨架共价结合所产生的最小荧光猝灭。
  • 非常高的水溶性,可促进缀合反应的化学操作。
  • 用于多色分析的具有可分辨发射光谱的大斯托克斯位移。
  • 多个位点可与有机和合成化合物(如抗体,花青染料或iFluor 染料)稳定结合。

 

特色产品

AAT Bioquest的ReadiUse™预活化PE染料使用Buccutite™FOL进行了预处理。用我们的Buccutite™MTA(可以免费提供样品)修饰您的抗体(或其他蛋白质),以获得MTA修饰的蛋白质(如抗体)。MTA修饰的蛋白质容易与FOL-修饰的PE(提供)反应,MTA修饰的蛋白质很容易与FOL修饰的PE(提供)反应,以获得比SMCC化学更高产量的所需PE-抗体缀合物。此外,我们的ReadiUse™预活化PE与MTA修饰的生物聚合物反应的浓度远低于SMCC化学。

 

藻胆蛋白的光谱特性

        有两类主要的藻胆蛋白:藻红蛋白和别藻蓝蛋白。这些藻胆蛋白主要在其蛋白质结构,藻胆素含量和荧光性质方面不同,通常用于荧光分析。

R-藻红蛋白(R-PE)

        R-藻红蛋白(货号:2558)是从红藻中分离出的240kDa藻胆蛋白。它呈现出强烈的黄橙色荧光,消光系数(ε)为1,960,000 cm-1M-1 ,量子产率(Φ)为0.84。R-PE由488 nm蓝色激光到561 nm黄绿激光的激光线激发。它的吸收光谱由三个吸收带组成,在565nm处显示出主吸收峰,在496nm和545nm处具有两个次级峰。不同物种的PE的二次峰相对显著性较大。R-PE的最大荧光发射波长为575nm,位于可见光谱的黄橙色区域中。与具有150,000cm-1M-1的消光系数(ε)和0.24的量子产率(Φ)的Cy3(货号:141)相比,R-PE明显更亮。

 

图1. ReadiUsePE(2500)的吸收(左)和发射(右)光谱。通过488nm氩激光(蓝色),543nm氦 - 氖激光(绿色)或561nm黄色二极管激光(绿 - 黄)可以有效激发PE。可以使用Cy3过滤器组显示PE。

 

别藻蓝蛋白(APC)

        别藻蓝蛋白(货号2554)是在蓝藻和红藻中发现的105kDA藻胆蛋白。APC呈现明亮的远红外荧光,消光系数为700,000 cm-1M-1,量子产率(Φ)为0.68。它受到633nm至647nm范围内的红色激光线的激发,并且在652nm处具有初级吸收最大值,在625nm处具有次级最大值。APC在662nm处具有最大荧光发射,其处于可见光谱的红色区域。与Cy5® (货号151)相比,它在红色区域也发出荧光,APC明显更亮,是流式细胞术更好的选择。这部分是由于Cy5的消光系数(ε=250,000cm-1M)-1)和量子产率(Φ= 0.20)较低。

 

图2. ReadiUseCL-APC(货号2503)的吸收(左)和发射(右)光谱。APC可以通过633 nm或647 nm红色激光线有效激发,并使用Cy5滤光片组进行可视化。

 

R-PE和APC产品

        我们提供完整的藻胆蛋白及其结合物组合,包括冻干的R-PE和APC,串联染料,链霉抗生物素蛋白结合物,结合试剂盒等。 

冻干的R-PE和APC

        ReadiUseTMPE(R-藻红蛋白)(货号:2500)和ReadiUseTMCL-APC(交联 - 别藻蓝蛋白)(货号:2503)以完全不含硫酸铵的冻干形式提供。去除这种强烈的沉淀剂(硫酸铵)消除了繁琐的蛋白质纯化过程,例如透析,并促进PE或APC与抗体和其他蛋白质如链霉抗生物素蛋白的快速结合。 

串联染料

        串联染料由两种不同的共价连接的荧光团组成,一种供体(例如R-PE或APC)和一种较长波长的荧光受体(例如Cy5,Cy7或iFluor 647)。通过被称为FRET的过程,能量从激发的供体转移到受体,从而产生受体的荧光发射特征。在流式细胞术中,串联染料由于其对单个激发源的利用以及其显著的斯托克斯位移,非常适合于细胞的多色参数分析。例如,图3说明了FITC(货号:120),PE(货号:2500),PE-Cy5(货号:2610)和PE-Cy7(货号:2616)的出色光谱分离,无需大量补偿即可对细胞进行四色分析。此外,488nm氩离子激光器有效地同时激发所有四种荧光团。

 

图3.FITC(绿色),PE(黄色),PE-Cy5®(橙色)和PE-Cy7®(红色)的吸收和发射光谱说明了它们清晰的光谱分离,可以对细胞进行四色分析。所有四种荧光团均被488nm氩激光线(蓝色)有效激发。FITC可以用FITC过滤器集进行可视化。使用Cy3过滤器组显示PE。PE-Cy5的®和PE-Cy7的®可以用Cy5和Cy7的滤光器组显示。

 

品牌

货号

产品名称

规格

价格

AAT

2500

 ReadiUse™PE [R-藻红蛋白] *无硫酸铵*

1mg

1140

AAT

2503

ReadiUse™CL-APC [交联 - 别藻蓝蛋白] *无硫酸铵*

1mg

1140

AAT

2558

PE [R-藻红蛋白] * CAS 11016-17-4 *

1mg

900

AAT

2554

APC [别藻蓝蛋白]

1mg

900

AAT

2552

 CL-APC [交联 - 别藻蓝蛋白]

1mg

900

AAT

2610

 PE-Cy5 Tandem

1mg

2340

AAT

2613

PE-Cy5.5串联

1mg

2340

AAT

2616

PE-Cy7 Tandem

1mg

2340

AAT

2619

PE-德州红串联染料

1mg

2340

AAT

2560

ReadiUse™预活化PE

1mg

3540

AAT

2580

ReadiUse™预活化PE-Cy5串联染料

1mg

4140

AAT

2581

ReadiUse™预活化PE-Cy5.5串联染料

1mg

4140

AAT

2582

ReadiUse™预活化PE-Cy7 串联染料

1mg

4140

AAT

2584

ReadiUse™预活化PE-iFluor™594 串联染料

1mg

4140

AAT

2577

ReadiUse™预活化PE-iFluor™647 串联染料

1mg

4140

AAT

2578

ReadiUse™预活化PE-iFluor™750串联染料

1mg

4140

AAT

2622

APC-Cy5.5 串联染料

1mg

2340

AAT

2625

APC-Cy7 串联染料

1mg

2340

AAT

2561

ReadiUse™预活化APC染料

1mg

3540

AAT

2586

ReadiUse™预活化APC-Cy5.5串联染料

1mg

4140

AAT

2587

ReadiUse™预活化APC-Cy7 串联染料

1mg

4140

AAT

2570

ReadiUse™预活化APC-iFluor™700串联染料

1mg

4140

AAT

2571

ReadiUse™预活化APC-iFluor™750 串联染料

1mg

4140

        百萤生物是 AAT Bioquest 中国区域一级代理商,为国内提供 AAT 的原装产品及产品定制、技术服务,欢迎咨询、订购!