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百萤生物小科普:四种用于细胞活性检测的方法推荐

English title: Biolite scientific knowledgeavailable:Methods For Determining Cell Viability

细胞活性的检测通常与细胞健康以及细胞群成功存活并正常运作的能力相联系,检测细胞的活性是每个细胞实验前期的重要工作之一。今天百萤为大家推荐四种实用性很强的用于细胞活性检测的方法。1.染色排除法;2.还原性染料检测法;3.荧光酯酶底物检测法;4.线粒体膜电位检测法。


 检测细胞活力的方法

染色排除法

使用不渗透细胞的染料区分活细胞和死细胞。由于死细胞膜破裂,染料流入细胞并被染色,而活细胞则不染色。台盼蓝或其他不渗透细胞的DNA结合染料是这中方法中的常用染料。


还原性染料检测法

氧化还原活力是与细胞代谢/种群存活细胞相关联的。使用发光/荧光指示剂,WST-8和刃天青,以监测细胞的代谢活性。WST-8和刃天青的低细胞毒性便于需要更长孵育时间的测定。


荧光酯酶底物检测法

细胞渗透型酯酶底物通过测量细胞酶活性和膜完整性来确定细胞活性。在扩散到活细胞中后,细胞内酯酶将所述底物水解成荧光化合物,该荧光化合物能够保留在细胞内一段时间,产生的信号强度与活细胞数量成正比。可以使用荧光仪器监测。


线粒体膜电位检测法

线粒体膜电位(ΔΨm)的丧失是细胞凋亡的早期特征,可以使用膜电位探针间接检测细胞活性。这些阳离子探针易于通过Δm隔离并染色活性线粒体,以鉴定活细胞。


表1.评估细胞活性和细胞毒性的常用参数和方法

检测类型 方法 试剂实例
细胞膜完整性 使用死细胞染料检测膜的完整性。膜受损的死细胞容易吸收这些染料并被染色。
细胞内酶活性 将染料加入活细胞中,通过检测细胞内酶活性来检测细胞活性

线粒体膜电位(ΔΨm)

使用可透过ΔΨm并累积在线粒体中的细胞渗透性染料来鉴定活细胞。
细胞代谢  使用不渗透细胞的四唑盐监测细胞的代谢活性
检测整个细胞群体的细胞氧化还原电位

使用生物发光检测来测量ATP和ADP。ADP / ATP比值的变化可用于区分细胞死亡和生存能力。


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