多种高灵敏度的Cal-520 钙离子荧光探针 任您选择

        百萤生物为您推荐的钙离子荧光探针Cal-520 为测细胞内钙动员提供了最强大的均匀荧光测定工具。Cal-520 AM是一种新型荧光钙敏感染料，与现有的绿色钙指示剂（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相比，信号背景比和细胞内保留率明显提高。较高的信号/背景比和更好的细胞内保留使Cal-520 钙测定成为评估GPCR和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的有力工具。

        我们初步研究表明，Cal-520 AM可以很容易地加载到豚鼠心脏中并在没有丙磺舒的情况下在那里停留几个小时。用Cal-520 AM可以很容易地监测钙信号，但在与其他绿色钙染料（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相同的条件下，很难观察到钙信号。

表 1.Fluo-3，Fluo-4，Fluo-8^®和Cal-520 的光谱比较

QY =在5mM柠檬酸钙存在下的荧光量子产率

Cal-520 AM的主要特点：

• 更好的保留在细胞内，与Fluo-3 AM和Fluo-4 AM相比，Cal-520 AM更好地保留在活细胞中。
• 更高的灵敏度，与Fluo-3 AM和Fluo-4 AM相比，Cal-520 AM在细胞中具有更高的信号/背景比。
• 方便，Cal-520 AM的光谱与Fluo-4 AM几乎相同。

图1.在相同条件下，用Calnecid 孵育的Cal-520 AM（红色曲线，货号：21131）或Fluo- 4AM（蓝色曲线）分别与CHO-K1细胞中的内源性P2Y受体的ATP刺激的钙响应。将CHO-K1细胞以50,000个细胞/100μL/孔接种过夜，在hhbs中加入100μl 5μm Fluo-4 AM或Cal-520 AM和2.5 mM丙苯酸，并在37℃培养2小时。使用flexisation®添加ATP（50μl/孔），以达到最终指示浓度。

图2.在相同条件下,没有丙磺舒,分别用Cal-520 AM（红色曲线，货号：21131）或Fluo-4 AM（蓝色曲线）孵育的CHO-K1细胞中内ATP刺激的钙刺激的钙响应。将CHO-K1细胞以50000个/100μl/孔的速度接种在Costar 96孔黑壁/透明底板中过夜。将HHBS中的100μL5μMFluo-4AM或Cal-520 TM AM添加到细胞中，并将细胞在37℃下孵育2小时。使用FlexSation^®加入ATP（50μL/孔）以实现最终指定浓度。

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