JC-1的优异替代品JC-10

JC-1的优异替代品JC-10

 

        JC-10 具有与JC-1类似的潜在依赖性光谱特性，用于检测凋亡细胞中的线粒体去极化， JC-10 比JC-1更优越，使用更方便，因为它具有更高的灵敏度和更高的水溶性JC-1作为低浓度或低膜电位的绿色荧光单体存在。然而，在较高浓度（高于0.1μM的水溶液）或更高电势下，JC-1形成红色荧光“J-聚集体”，其表现出宽的激发光谱和非常窄的发射光谱。由于J-聚集体的形成随着施加的膜电位在30-180mV的范围内线性增加，因此这种现象可用于电位测量。 JC-1对于线粒体与质膜电位更具特异性，并且对其去极化的反应比其他一些阳离子染料如DiOC6（3）和罗丹明123更为一致。

        通过组合绿色荧光JC-1单体（Ex / Em = ~514 / 529nm）和红色荧光J-聚集体（Ex / Em = ~585 / 590nm）的信号，可以进行各种类型的比率测量，它可以在485 nm和大吸收之间的任何地方有效激发。 JC-1广泛用于检测凋亡细胞中的线粒体去极化和测定多药耐药细胞。它还常用于基于细胞的高通量测定中的线粒体功能评估。

图1.在Jurkat细胞里，使用Cell Meter JC-10 线粒体膜电位检测试剂盒（Cat＃22801）检测FCCP诱导的线粒体膜电位变化

 

        AAT Bioquest开发的JC-10 是JC-1的优异替代品。 JC-10 具有与JC-1类似的潜在依赖性光谱特性，用于检测凋亡细胞中的线粒体去极化。 JC-10 比JC-1更优越，使用更方便，因为它具有更高的灵敏度和更高的水溶性.JC-1水溶性差，因此在一些应用中难以使用。即使在1μM浓度下，JC-1也倾向于在水性缓冲液中沉淀。当需要高染料浓度时，JC-10 能够选择性地进入线粒体，并随着膜电位的增加可逆地将其颜色从绿色变为橙色。这种性质是由于膜极化时JC-10 聚集体的可逆形成导致发射光从520nm（即JC-10 单体形式的发射）转变为570nm（即J-聚集体的发射） 。当在490nm处激发时，随着线粒体膜变得更加极化，JC-10 的颜色从绿色到橙色可逆地变化。使用流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以使用荧光通道1（FL1）和使用通道2（FL2）的橙色发射来分析绿色发射。除了用于流式细胞仪外，JC-10 还可用于荧光成像。我们开发了一种在荧光微孔板平台中使用JC-10 的方案。在一些细胞系中，JC-10 的性能远优于JC-1。

图2.在Jurkat细胞中用JC-10 （Cat＃22204）和JC-1（Cat＃22200）测量喜树碱诱导的线粒体膜电位变化

 

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