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Transfectamine 5000转染试剂

      Transfectamine 5000转染试剂是美国AAT Bioquest生产的转染试剂,Transfectamine 5000转染试剂是一种功能强大且用途广泛的转染试剂,可将核酸引入真核细胞,引入动物细胞。它可以有效地将各种有效载荷转染到各种粘附和悬浮细胞系中。它可用于质粒DNA转染以及基于siRNA和shRNA的基因敲低实验和基因表达研究。它在包括难于转染的细胞在内的各种贴壁和悬浮细胞系中始终提供高转染效率。Transfectamine 5000的低毒性也使转染细胞具有更高的生存能力。与大多数其他转染试剂相比,Transfectamine 5000更易于使用,并且不需要特殊的介质。

 

有效转染难于转染的细胞

      Transfectamine 5000试剂专门针对难转染的细胞种类进行了优化,能够为广泛的细胞种类提供卓越的转染性能。

 

经济高效地转染常规细胞

      对于常见的细胞种类而言,Transfectamine 5000试剂相比其他试剂具有更高的浓度和更低的用量,从而为客户带来更好的性价比。

 

样品示例及操作

1.细胞培养准备

1.1转染时将细胞培养至约90%融合。

1.2转染前用新鲜的生长培养基替换。 例如,对于6孔板,每孔用2 mL培养基替换,对于10 cm板,用6 mL培养基替换。

2.转染方案

将Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培养板并培养过夜。 注意:重组蛋白最早可在转染后16小时开始检测。转染后72〜96小时可观察到最大表达水平。

 

6孔板与10cm板样品方案

组成 6孔板(每孔) 10厘米板
新鲜培养基 2ml 6ml
质粒 ~2.5ug 7.5-10ug
无血清培养基 200ul 600ul
Transfectamine 5000转染试剂 7.5ul ~22.5ul

图1.使用Transfectamine 5000,Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂在HeLa细胞中的转染效率比较。 每种试剂用于以96孔格式转染HeLa细胞,转染后24小时分析GFP表达。 与Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000试剂相比,Transfectamine 5000转染试剂可提供更高的GFP转染效率。


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