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小萤问号之DiI探针剖析解密

 

1.什么是DiI?它的用途是什么?

答:DiI即DiIC18(3)是常见的细胞膜荧光探针之一,全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine 。呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光。它的家族还有DiR、DiO、DiA、DiS、DiD。

 

2.如何区别DiI探针中的C12、C16、C18

答:从水溶性来讲,小分子的水溶性更好,所以C12>C16>C18。DiI家族中的I、D、R分别代表了一个、两个、三个链,它们是决定波长长度的关键所在。从下1、2图中可以看出DiI家族化学结构均是以苯环+五环碳相对称的结构。

 

3.如何正确选择DiI家族荧光探针?

答:DiI比DiO更亮;DiD,DiR(D12731)波长更长,更适合组织染色;C16,C12的亲脂性稍差,但它们比DiI更容易掺入膜中

它们均可染色活细胞或固定细胞及组织(请您根据您的需求选择相应的探针)

 

下图是DiO、DiI、DiD、DiR的光谱图

 

4、使用DiI怎样才算是成功染色?

答:染色示例图如下:(图二染色比图一更清晰,两图都算成功染色)