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工具:蛋白浓度计算器

 

        蛋白浓度计算器是美国AAT Bioquest设计的一种在线即时浓度计算工具,以方便研究人员准确、便捷的进行浓度计算。

        如果已经知道蛋白分子量和摩尔吸收系数,可以根据比尔-朗伯定律,计算溶液中蛋白的浓度。λmax 指的是吸收最强值
所对应的波数,对于蛋白来说,最大吸收波数一般使用 280 nm。最大吸收波长处的吸光率可以通过分光光度仪来测量,在
测定蛋白的吸收光谱时需注意以下几项:

 

1.蛋白需要溶解完全,任何蛋白的沉淀会给浓度的测量和计算带来偏差。
2.吸光度的读数不应该超过仪器的量程,导致吸收曲线出现平台。如果出现这种情况,应该稀释蛋白溶液再进行测量。
3.此蛋白浓度计算式是采用 1cm 标准光程作为基准,应使用 1cm 宽的石英比色皿,如果使用其它尺寸的分光皿,所测的值应
予校正。
 
 
蛋白浓度计算原理

 

示例图

 

计算

注:浓度计算所需的所有数据均根据实际实验及所选蛋白进行调整(消光系数及分子量会根据您在计算工具中的蛋白选择而自行调整)

 

操作步骤

1.选择所要分析的蛋白,如果不是选项中的蛋白,请选择 "custom sequence",然后输入蛋白氨基酸序列。

2.输入最大吸收的波长。蛋白一般最大吸收在 280 nm。但是,不同蛋白有不同的最大
吸收波长,请按仪器所测的最大吸收波
长为准,输入最大吸收峰处的波数。

3.如果测量使用的蛋白溶液是已稀释的溶液,请输入稀释的倍数,用以计算蛋白的原始浓度。

4.如果所使用的比色皿的光程不是 1cm,请输入正确的光程。

5.点击 "计算" 后即可显示蛋白浓度。
 
>>点击进行蛋白浓度计算
 

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