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膜联蛋白V染色(Annexin-V Staining)

English title: Annexin-V Staining

细胞膜的改变是活细胞早期凋亡的标志。在细胞凋亡的初始阶段,磷脂酰丝氨酸 (PS) 残基从细胞膜的内叶转移到外叶。在细胞成像和流式细胞术中,荧光标记的膜联蛋白 V 缀合物通常用于与外化 PS 残基结合来检测凋亡细胞。

表1:膜联蛋白 V 缀合物简介

应用 检测外化磷脂酰丝氨酸以识别凋亡细胞
适用仪器 荧光显微镜、其他活细胞成像仪器和流式细胞仪
活细胞 适用
可固定 可以,用甲醛染色后固定
多路复用 可用于多重分析


用于检测细胞凋亡的膜联蛋白 V 缀合物

与 iFluor 染料结合的膜联蛋白 V 提供了一种快速可靠的方法来检测外化 PS。 Annexin V iFluor 探针的亮度和光稳定性明显优于大多数 Alexa Fluor® 和其他光谱相似的 Annexin v 缀合物。

表2:可用于细胞凋亡检测的膜联蛋白 V 缀合物

Annexin V 标签 Ex (nm) Em (nm) 滤波片 ε Φ 规格 货号
iFluor 350 345 450 DAPI 20000 0.95 100 tests (200 µL) 20070
iFluor 488 491 516 FITC 75000 0.9 100 tests (200 µL) 20071
iFluor 555 557 570 TRITC 100000 0.64 100 tests (200 µL) 20072
iFluor 594 588 604 Texas Red 180000 0.53 100 tests (200 µL) 20073
iFluor 633 640 654 Texas Red 250000 0.29 100 tests (200 µL) 20069
iFluor 647 656 670 Cy5 250000 0.25 100 tests (200 µL) 20074
iFluor 680 684 701 Cy5.5 220000 0.23 100 tests (200 µL) 20075
iFluor 700 690 713 Cy5.5 220000 0.23 100 tests (200 µL) 20077
iFluor 750 757 779 Cy7 275000 0.12 100 tests (200 µL) 20076
AF350 (Alexa Fluor® 350 equivalent) 343 441 DAPI 19000 N/D³ 100 tests (200 µL) 20090
AF488 (Alexa Fluor® 488 equivalent) 499 520 FITC 73000 0.92 100 tests (200 µL) 20092
AF594 (Alexa Fluor® 594 equivalent) 590 618 Texas Red 92000 0.66 100 tests (200 µL) 20096
FITC 491 516 FITC 73000 0.79 100 tests (200 µL) 20030
TRITC 544 570 TRITC 100000 0.1 100 tests (200 µL) 20031
Cy3 555 569 Cy3/TRITC 150000 0.04 100 tests (200 µL) 20065
Cy5 656 670 Cy5 250000 0.25 100 tests (200 µL) 20066
Cy5.5 684 701 Cy5.5 220000 0.23 100 tests (200 µL) 20067
Cy7 756 779 Cy7 250000 0.3 100 tests (200 µL) 20068

 

用于流式细胞术的膜联蛋白 V 缀合物

与 mFluor 染料、PacBlue、APC 和 PE 结合的膜联蛋白 V 是通过流式细胞术检测细胞凋亡的探针。这些缀合物可以与其他染料(如核酸染料)结合使用,以准确评估凋亡、坏死和死细胞的混合群体。

图1. 在 Jurkat 细胞中检测 Annexin V-mFluor Violet 450 缀合物与磷脂酰丝氨酸的结合活性。

表3:可用于细胞凋亡检测的膜联蛋白 V 缀合物

Annexin V 标签 激光 Ex (nm) Em (nm) 通道 ε Φ 规格 货号
PacBlue Violet Laser 410 455 DAPI/FL-1 Channel 46000 0.78 100 tests (200 µL) 20089
mFluor Violet 450 Violet Laser 403 454 DAPI/FL-1 Channel 25000 0.92 100 tests (200 µL) 20080
mFluor Violet 510 Violet Laser 414 510 FITC/FL-1 Channel 30000 0.86 100 tests (200 µL) 20081
mFluor Violet 540 Violet Laser 424 560 PE/FL-2 Channel 15000 0.64 100 tests (200 µL) 20082
mFluor Blue 570 Blue Laser 533 570 PE/FL-2 Channel 120000 0.08 100 tests (200 µL) 20085

 

Cell Meter Annexin V系列凋亡检测

Cell Meter Annexin V 凋亡检测试剂盒提供了一种快速方便的方法,通过检测磷脂酰丝氨酸的外化来检测凋亡细胞。每个试剂盒都包含与 iFluor 染料、mFluor 染料、APC、PE 或 FITC 结合的重组膜联蛋白 V,用于检测早期凋亡细胞中易位的 PS。PI 和Nuclear Red DCS1 都不能渗透活细胞,但会用强烈的红色荧光染色坏死和死细胞。用膜联蛋白 V 缀合物和核酸染料染色细胞后,凋亡细胞会显示出膜联蛋白 V 缀合物荧光,死细胞显示出红色和膜联蛋白 V 缀合物荧光,活细胞显示出很少荧光或没有荧光。使用流式细胞仪可以很容易地区分细胞群。

表4:Cell Meter Annexin V 结合凋亡检测选择指南

Annexin V缀合物 死细胞染色 Annexin V 缀合物 Ex/Em 死细胞染色 Ex/Em 规格 货号
Annexin V-iFluor 488 PI 490/ 520 nm 534/617 nm 100 Tests 22824
Annexin V-iFluor 555 554/578 nm / 100 Tests 22825
Annexin V-iFluor 594 590/610 nm / 100 Tests 22826
Annexin V-iFluor 647 650/668 nm / 100 Tests 22827
Annexin V-mFluor Violet 450 PI 405/450 nm 534/617 nm 100 Tests 22828
Annexin V-mFluor™ Violet 500 PI 414/508 nm 534/617 nm 100 Tests 22829
Annexin V-mFluor Violet 550 PI 424/560 nm 534/617 nm 100 Tests 22830
Annexin V-APC PI 651/662 nm 534/617 nm 100 Tests 22837
Annexin V-PE Nuclear Red DCS1 565/575 nm 631/651 nm 100 Tests 22838
Annexin V-FITC PI 490/520 nm 534/617 nm 100 Tests 22839

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