细胞膜的改变是活细胞早期凋亡的标志。在细胞凋亡的初始阶段,磷脂酰丝氨酸 (PS) 残基从细胞膜的内叶转移到外叶。在细胞成像和流式细胞术中,荧光标记的膜联蛋白 V 缀合物通常用于与外化 PS 残基结合来检测凋亡细胞。
表1:膜联蛋白 V 缀合物简介
应用 |
检测外化磷脂酰丝氨酸以识别凋亡细胞 |
适用仪器 |
荧光显微镜、其他活细胞成像仪器和流式细胞仪 |
活细胞 |
适用 |
可固定 |
可以,用甲醛染色后固定 |
多路复用 |
可用于多重分析 |
用于检测细胞凋亡的膜联蛋白 V 缀合物
与 iFluor 染料结合的膜联蛋白 V 提供了一种快速可靠的方法来检测外化 PS。 Annexin V iFluor 探针的亮度和光稳定性明显优于大多数 Alexa Fluor® 和其他光谱相似的 Annexin v 缀合物。
表2:可用于细胞凋亡检测的膜联蛋白 V 缀合物
用于流式细胞术的膜联蛋白 V 缀合物
与 mFluor 染料、PacBlue、APC 和 PE 结合的膜联蛋白 V 是通过流式细胞术检测细胞凋亡的探针。这些缀合物可以与其他染料(如核酸染料)结合使用,以准确评估凋亡、坏死和死细胞的混合群体。
图1. 在 Jurkat 细胞中检测 Annexin V-mFluor Violet 450 缀合物与磷脂酰丝氨酸的结合活性。
表3:可用于细胞凋亡检测的膜联蛋白 V 缀合物
Annexin V 标签 |
激光 |
Ex (nm) |
Em (nm) |
通道 |
ε |
Φ |
规格 |
货号 |
PacBlue |
Violet Laser |
410 |
455 |
DAPI/FL-1 Channel |
46000 |
0.78 |
100 tests (200 µL) |
20089 |
mFluor Violet 450 |
Violet Laser |
403 |
454 |
DAPI/FL-1 Channel |
25000 |
0.92 |
100 tests (200 µL) |
20080 |
mFluor Violet 510 |
Violet Laser |
414 |
510 |
FITC/FL-1 Channel |
30000 |
0.86 |
100 tests (200 µL) |
20081 |
mFluor Violet 540 |
Violet Laser |
424 |
560 |
PE/FL-2 Channel |
15000 |
0.64 |
100 tests (200 µL) |
20082 |
mFluor Blue 570 |
Blue Laser |
533 |
570 |
PE/FL-2 Channel |
120000 |
0.08 |
100 tests (200 µL) |
20085 |
Cell Meter Annexin V系列凋亡检测
Cell Meter Annexin V 凋亡检测试剂盒提供了一种快速方便的方法,通过检测磷脂酰丝氨酸的外化来检测凋亡细胞。每个试剂盒都包含与 iFluor 染料、mFluor 染料、APC、PE 或 FITC 结合的重组膜联蛋白 V,用于检测早期凋亡细胞中易位的 PS。PI 和Nuclear Red DCS1 都不能渗透活细胞,但会用强烈的红色荧光染色坏死和死细胞。用膜联蛋白 V 缀合物和核酸染料染色细胞后,凋亡细胞会显示出膜联蛋白 V 缀合物荧光,死细胞显示出红色和膜联蛋白 V 缀合物荧光,活细胞显示出很少荧光或没有荧光。使用流式细胞仪可以很容易地区分细胞群。
表4:Cell Meter Annexin V 结合凋亡检测选择指南
Annexin V缀合物 |
死细胞染色 |
Annexin V 缀合物 Ex/Em |
死细胞染色 Ex/Em |
规格 |
货号 |
Annexin V-iFluor 488 |
PI |
490/ 520 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22824 |
Annexin V-iFluor 555 |
无 |
554/578 nm |
/ |
100 Tests |
22825 |
Annexin V-iFluor 594 |
无 |
590/610 nm |
/ |
100 Tests |
22826 |
Annexin V-iFluor 647 |
无 |
650/668 nm |
/ |
100 Tests |
22827 |
Annexin V-mFluor Violet 450 |
PI |
405/450 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22828 |
Annexin V-mFluor™ Violet 500 |
PI |
414/508 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22829 |
Annexin V-mFluor Violet 550 |
PI |
424/560 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22830 |
Annexin V-APC |
PI |
651/662 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22837 |
Annexin V-PE |
Nuclear Red DCS1 |
565/575 nm |
631/651 nm |
100 Tests |
22838 |
Annexin V-FITC |
PI |
490/520 nm |
534/617 nm |
100 Tests |
22839 |
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