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细胞毒性(Cell Cytotoxicity)

English title: Cell Cytotoxicity

细胞毒性试验广泛用于筛选化合物的细胞毒性,这可以通过检测膜完整性、细胞凋亡和细胞活力的不同标记来实现。

评估细胞膜完整性是检测细胞活力和细胞毒性作用的常用方法之一。 重要的染料,例如台盼蓝碘化丙啶,通常被排除在健康细胞内部之外。 然而,如果细胞膜受损,它们可以自由穿过膜并染色细胞内成分。 或者,可以通过检测化合物从细胞质泄漏到周围培养基中来评估膜完整性。 乳酸脱氢酶 (LDH) 的释放通常被检测以使用酶促 LDH 来检测细胞毒性。 此外,细胞活力可以通过细胞凋亡的生化标志物(如caspase-3)来检测。

细胞毒性也可以通过酶活性或活细胞中特定细胞物质的含量来检测。 氧化还原染料通常用于指示活细胞的氧化还原电位。 例如,活细胞可以将 MTS 试剂还原为有色甲臜,而非荧光刃天青可以还原为荧光刃天青。 除了使用染料检测细胞活力外,特定细胞物质(如 ATP)的含量也可用作活力的标志物。 

 

Cell Meter 细胞毒性检测试剂盒

图1.  将 0 至 10,000 个细胞/孔/100 µL 的 CHO-K1 细胞接种在 Costar黑色透明96 孔板中过夜。 将细胞与 20 µL/孔的检测溶液(组分 A)在 37 °C 下孵育 3 小时。 使用 SpectraMax plus (Molecular Devices) 在 570 nm 和 605 nm 处测量吸光度强度。 如图所示,OD570/OD605 的比率与细胞数成正比。


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