Cell Meter™细胞粘附测定试剂盒
| Ex (nm) | 494 | Em (nm) | 514 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.专为荧光酶标仪设计
2.稳定性好，操作流程简便
适用范围
用于多种细胞类型的细胞-细胞或细胞-表面粘附力测定
产品介绍
Cell Meter™细胞粘附检测试剂盒是一种快速、灵敏的检测工具，适用于多种细胞类型的细胞-细胞或细胞-表面粘附力测定。本检测采用Calcein UltraGreen AM荧光染料标记细胞，待细胞完成粘附后洗除非粘附细胞，通过检测Calcein UltraGreen的荧光强度即可定量计算粘附细胞数量。我们卓越的荧光染料Calcein UltraGreen AM为细胞粘附检测提供了快速灵敏的解决方案——该染料本身无荧光特性，但进入细胞后经内源性酯酶水解会生成高荧光度的Calcein UltraGreen。这种明亮的荧光标记物具有pH不依赖性，可稳定存在于细胞质中，且对细胞粘附过程的干扰小。
Cell Meter™细胞粘附检测试剂盒专为荧光酶标仪设计，其显著优势在于：Calcein UltraGreen AM染料性能稳定，操作流程简便，有效规避了传统检测方法的弊端——既避免了放射性同位素检测产生的有害废弃物，也克服了共价偶联细胞表面标记物可能影响细胞正常功能的缺陷。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
|
荧光酶标仪 |
|
| Ex: | 490mn |
| Em： | 525mn |
| Cutoff | 515 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
样品分析方案
概述
添加细胞
在37°C下孵育细胞使其贴壁
去掉未贴壁细胞
添加Calcein Ultragreen AM工作溶液
在37°C下孵育细胞20-30分钟
去除上清液并用HHBS或DPBS洗涤细胞
使用荧光酶标仪（Ex / Em = 490/525 nm）检测荧光强度
储备溶液配制
Calcein Ultragreen AM储备溶液
工作溶液配制
Calcein Ultragreen AM工作溶液
注意：10 mL Calcein Ultragreen AM工作溶液可以进行100次测试。
操作步骤
以下方案可用作指导，应根据需要进行优化。
1.在涂有所需试剂的板上添加100 µL体积的细胞。
2.在37°C下孵育平板2至3小时。
注意：对于每种细胞系，孵育时间应通过实验进行测试。
3.除去生长培养基和未贴壁的细胞。
4.加入100 µL钙黄绿素Ultragreen AM工作溶液，并在37°C下孵育平板20-30分钟。
注意：对于每种细胞系，孵育时间应通过实验进行测试。
5.除去染料工作溶液，并用1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液或DPBS洗涤细胞一次。
6.在孔中加入100 µL粘附测定缓冲液。
7.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）处检测荧光强度。
试剂应用文献
C/EBPb--VCAM1 axis in Kupffer cells promotes hepatic inflammation in MASLD
Authors: Lin, Shuang-Zhe and Xie, Yang and Cheng, Yu-Qing and Liu, Mingxi and Chen, Yuan-Wen and Fan, Jian-Gao
Journal: JHEP (2025): 101418
