Screen Quest 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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适用范围
用于测定含有脂肪酸转运蛋白的细胞对脂肪酸的摄取能力
产品介绍
脂肪酸摄取是治疗肥胖、2型糖尿病和肝脂肪变性等多种人类疾病的重要靶点。
Screen Quest™荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒提供了一种简单灵敏的方法，用于测定含有脂肪酸转运蛋白的细胞对脂肪酸的摄取能力。该试剂盒采用专利的十二烷酸荧光脂肪酸底物，适用于任何具备底读模式或FITC通道的荧光酶标仪。本检测可在96孔或384孔微孔板中通过简单的混合读取步骤完成，并能轻松适配高通量筛选应用。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 485nm |
| Em： | 515nm |
| cutoff: | 495nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明孔板 |
| 读取模式: | 底部读取 |
样品实验方案
简要概述
1.在生长培养基中培养细胞4-6小时
2.将细胞转移到无血清培养基中1小时，并根据需要处理细胞
3.加入100μL/孔的脂肪酸染料加载溶液
4.监测荧光增加在Ex / Em = 485/515 nm处立即进行动力学或在孵育60分钟后进行终点读数（底部读取模式）
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。
TF2-C12脂肪酸原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到TF2-C12脂肪酸（组分A）的小瓶中并充分混合。
注意：20μL荧光脂肪酸底物原液足以用于一个平板。 如果将管密封并避光，可以将未使用的荧光脂肪酸底物储备溶液等分并在<-20℃下储存长达两个月。 避免反复冻融
2.工作溶液配制
脂肪酸染料加载溶液：
将20μLTF2-C12脂肪酸储备溶液加入10mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合。 注意：10毫升脂肪酸染料加载溶液足以用于一个平板; 为每个平板做准备并进行实验。
操作步骤
1.根据需要用测试化合物处理细胞。
2.从培养箱中取出化合物处理的细胞板，加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）（包括空白孔）的脂肪酸染料加载溶液。
3.使用底部读取模式，使用荧光酶标仪在Ex / Em = 485 / 515nm（在495nm处截止）测量荧光信号。
注意：对于动力学读数：立即以20秒间隔读取荧光强度30-60分钟。
注意：对于终点读数：读取30-60分钟孵育结束时的荧光强度。
试剂应用文献
