Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。甲醛是自发产生的物质。上层大气中，可以自发贡献这个环境总甲醛的90%。生物体内很少遇到单体或者水合物甲醛。甲烷的生成通过等效量甲醛，但是在甲烷化时一碳物种被亚甲基类所掩饰。甲醛是甲醇毒性的原因，因为甲醇通过乙醇脱氢酶转变为甲醛。Amplite荧光法甲醛分析试剂盒 *绿色荧光* 利用专有的无荧光染料通过与甲醛反应产生强荧光。这个荧光试剂盒可以提供敏感的混合和读取的方法来检测甲醛。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。它的信号可以通过酶标仪在400／510nm处轻易地读取。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒。 

 

适用仪器

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荧光酶标仪
Ex:	410nm
Em：	525nm
cutoff:	495nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

样品实验方案

简要概述

1.准备甲醛标准品和/或测试样品（50μL）
2.添加AldeLight 绿色工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育20至60分钟
4.监测Ex / Em = 410/525 nm处的荧光增加（截止= 495 nm）

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 AldeLight 绿色原液（500X）：
将20μLDMSO（组分D）加入AldeLight Green（组分A）小瓶中，制成500X AldeLight Green原液。

1.2 甲醛标准溶液（123 mM）：
将5μL37.2％甲醛标准品（组分C）加入0.5mL测定缓冲液（组分B）中，制成123mM甲醛标准溶液。

 

2.标准溶液

2.1醛标准溶液

将12.2μL123mM甲醛标准溶液加入0.5mL测定缓冲液（组分B）中，制成3mM甲醛标准溶液。 取3mM甲醛标准溶液，在测定缓冲液（组分B）中进行1:10，制成300μM甲醛标准品（FS7）。 取300μM甲醛标准品（FS7）并进行1：3连续稀释，得到连续稀释的甲醛标准品（FS6-FS1）和分析缓冲液（组分B）。

 

3.工作溶液

将10μL500XAldeLight Green原液加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成AldeLight Green工作溶液。 注意：5 mL AldeLight Green工作溶液足以容纳1个板。 AldeLight 绿色工作溶液不稳定，好在2小时内使用。

 

样品分析

表1.固体背96孔微孔板中甲醛标准品和测试样品的布局。 FS =甲醛标准品（FS1-FS7,0.41至300μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
FS1	FS1	...	...
FS2	FS2	...	...
FS3	FS3
FS4	FS4
FS5	FS5
FS6	FS6
FS7	FS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
FS1-FS7	50ul	连续稀释液（0.41至300μM）
BL	50ul	分析缓冲液
TS	50ul	测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备甲醛标准品（FS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向甲醛标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeLight Green工作溶液，使总甲醛测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLAldeLight Green工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应20至60分钟，避光。

4.用Ex / Em = 410 / 525nm（截止= 495nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

Biological Activity of Peptide-conjugated Polyion Complex Matrices Consisting of Alginate and Chitosan
Authors: Chikara Fujimori, Jun Kumai, Kyotaro Nakamura, Yingzi Gu, Fumihiko Katagiri, Kentaro Hozumi, Yamato Kikkawa, Motoyoshi Nomizu
Journal: Peptide Science (2016)

Hepatic Deficiency of Augmenter of Liver Regeneration Exacerbates Alcohol-Induced Liver Injury and Promotes Fibrosis in Mice
Authors: Sudhir Kumar, Jiang Wang, Richa Rani, Chandrashekhar R Gandhi
Journal: PloS one (2016): e0147864

Integrated self-assembling drug delivery system possessing dual responsive and active targeting for orthotopic ovarian cancer theranostics
Authors: Chun-Jui Lin, Chen-Hsiang Kuan, Li-Wen Wang, Hsi-Chin Wu, Yunching Chen, Chien-Wen Chang, Rih-Yang Huang, Tzu-Wei Wang
Journal: Biomaterials (2016): 12--26

Fiber-optic protease sensor based on the degradation of thin gelatin films
Authors: Bastien Schyrr, Stéphanie Boder-Pasche, Réal Ischer, Rita Smajda, Guy Voirin
Journal: Sensing and Bio-Sensing Research (2015): 65--73

 

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