线粒体膜电位荧光探针JC-10 —— JC-1的替代品
线粒体膜电位是线粒体健康的重要指示剂,线粒体膜通透性的变化是诱导细胞凋亡的重要步骤,JC-1 是一种亲脂性的阳离子染料,常用来检测线粒体去极化。然而 JC-1 水溶性较差,1uM 浓度的含量在缓冲液中都会发生沉淀,所以它在生物学实验中受到一些限制,尤其是在成像系统和荧光酶标仪上的应用,因为完全移除非溶解的荧光颗粒对获取的实验数据十分重要。
图 1.在 Jurkat 细胞中用 JC-10 和 JC-1测量了喜树碱诱导的线粒体膜电位变化。 用喜树碱(10mM)处理 Jurkat细胞 4 小时后,向孔中加入 JC-1 和JC-10 染料上样溶液并孵育 30 分钟。使用 NOVOstar 酶标仪(BMG Labtech)在 Ex / Em = 490 / 525nm 和490 / 590nm 下测量 J 聚集体和单体形式的 JC-1 和 JC-10 的荧光强度。
操作步骤
1.准备含有测试化合物的细胞
2.添加 JC-10 工作溶液(100μL/孔用于 96 孔板或 25μL/孔用于 384 孔板)
3.在室温或 37 摄氏度孵育 1 小时
4.在 Ex / Em = 490nm / 525nm 和 540nm / 590nm 读取荧光强度
JC-10 是美国 AAT Bioquest 公司研发和生产的一种代替 JC-1 的荧光探针,它具有更好的水溶性。
JC-10 和 JC-1 一样能够选择性进入线粒体,当线粒体膜电位增加时,颜色可从绿色变为橙色。这种性质有其固有的可逆的化学结构决定。高浓度时,线粒体膜极化,JC-1 以多聚体形式存在,发射波长为 570nm;低浓度时,JC-10 以单体形式存在,发射波长为 520nm。490nm 激发时,JC-10 的颜色会随着线粒体膜极化程度的增加而从绿色变为淡黄色。
两种染料均可使用流式细胞仪、显微镜和微孔板读板机进行检测,除此之外,JC-10 还能应用于荧光成像和荧光酶标仪平台。
订购信息
产品编号 产品名称 规格 价格 折扣 22800 JC-10 线粒体膜电位检测试剂盒
*适合微孔板检测*500 Tests 3540 2830 22801 JC-10 线粒体膜电位检测试剂盒
*适合流式细胞检测*100 Tests 3540 2830 22204 线粒体膜电位荧光探针 JC-10
*JC-1 的代替品*5 x 100ul 1140 912