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Amplite 比色法醛类定量试剂盒 蓝色

英文名称:Amplite® Colorimetric Aldehyde Quantitation Kit *Blue Color*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势

1.具有"即混即读"的便捷操作特性,检测灵敏度可达0.4 μM

2. 兼容96孔或384孔微孔板检测

3.无需分离步骤,便于自动化操作

 

适用范围

用于醛类定量

 

产品介绍

近年来,细胞膜脂质过氧化反应所产生的醛类物质,因其生成机制、反应活性及毒性效应等方面的特性,受到了研究界的广泛关注。在生物医学研究、化学分析、食品工业及环境监测等多个领域,醛类物质的快速精准检测已成为一项重要课题。然而,目前市场上可用于醛类定量的检测试剂或试剂盒选择有限,现有检测方法主要依赖于高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)或气相色谱-质谱联用(GC-MS)等分离技术,这些方法不仅操作繁琐,而且成本高昂。

10053号试剂盒采用了专利显色染料技术,该染料与醛类物质反应后可产生显著的显色产物。这款比色法检测试剂盒具有"即混即读"的便捷操作特性,检测灵敏度可达0.4 μM。该检测方案支持96孔或384孔微孔板操作模式,无需任何分离步骤即可轻松实现自动化检测流程,大幅提升了实验效率。

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 620nm
推荐孔板: 透明底板
实验方案

标准操作流程

简要概述

1.准备醛类标准品/测试样品(50 µL)

2.加入2× AldeView™ Blue工作液(50 µL)

3.室温(RT)孵育20分钟

4.加入AldeView™ Blue增强剂(50 µL)

5.再次室温孵育20分钟

6.监测620 nm处吸光度变化

 

储备溶液制备

(注:所有未使用的储备液应分装为单次用量,配制后于-20°C保存,避免反复冻融)

醛类标准品溶液(10 mM):

取1 mL检测缓冲液(组分B)加入醛类标准品(组分D)瓶中,配制成10 mM标准溶液。

标准品梯度稀释

推荐使用在线稀释计算工具:https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/10053

操作步骤:

1.取10 mM醛类标准品溶液,用检测缓冲液(组分B)进行1:100稀释,获得100 µM标准溶液(AS7);

2.取100 µM标准溶液(AS7),用检测缓冲液(组分B)按1:2进行连续稀释,获得AS6至AS1系列标准品溶液。

 

工作液配制

向AldeView™ Blue(组分A)瓶中加入5 mL检测缓冲液(组分B),配制成2× AldeView™ Blue工作液。

注意事项:

5 mL 2×工作液可满足一块微孔板检测需求;

工作液稳定性较差,建议配制后2小时内使用。

 

样品分析

表1.在具有透明底部的白色96孔微孔板中的醛标准品和测试样品的布局。 AS =醛标准品(AS1-AS7,1.56至100μM),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 ... ...
AS2 AS2 ... ...
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(1.56至100μM)
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备醛标准品(AS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用12.5μL试剂代替50μL。

2.在醛标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeView Blue工作溶液,使总醛测定体积为100μL/孔。 384孔板,每个孔中加入12.5μLAldeView Blue工作溶液,总体积为25μL/孔。

3.在室温避光孵育反应20-30分钟。

4.每孔加入50μLAldeView Blue Enhancer(组分C)。 对于384孔板,每孔加入25μLAldeView Blue Enhancer。

5.在室温避光孵育反应20分钟,

6.使用吸光度读板仪在620至660 nm(620 nm)下监测吸光度的增加。