Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒

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产品优势

1.检测快速

2.特异性强：几乎不受其他醛类物质干扰

3.操作简便：适配标准酶标仪检测

适用范围

用于丙二醛定量检测

产品介绍

丙二醛（MDA）作为脂质过氧化的天然产物，是评估氧化应激和自由基生成的关键指标。传统检测方法基于MDA与硫代巴比妥酸（TBA）的反应，通过比色法或荧光法进行测定，但该方法特异性较差，且需在90-100°C的酸性条件下完成，而现有商业ELISA试剂盒则存在成本高、操作繁琐等问题。

Amplite®比色法丙二醛定量检测试剂盒采用MDA Blue™显色探针，无需TBARS法的加热步骤即可实现MDA的快速检测。该探针与MDA反应生成蓝色产物（检测波长695 nm），具有检测速度快、特异性强（几乎不受其他醛类干扰）等优势，可直接通过酶标仪完成测定。

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品（50μL）
2.添加MDA Blue 原液（10μL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液（40μL）
5.监测OD增加至695nm

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液（100 mM）：
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶（组分C）中以制备100mM MDA储备溶液。

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液（组分B）中，得到400μMMDA溶液（MDA7）。 然后在稀释缓冲液中进行1：2连续稀释，得到连续稀释的MDA标准品（MDA6-MDA1）。

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品（MDA），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue （组分A）溶液加入MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板，每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液（组分D），使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，使用20μL反应溶液，总测定体积为50μL/孔。

5.将终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加，在OD为695~700nm时进行路径校正校正。