Amplite 荧光法甲醛定量试剂盒 绿色荧光

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产品优势

1.无需分离步骤即可实现自动化操作

2.可便捷地应用于96孔板或384孔板检测体系

 

适用范围

用于甲醛定量检测

 

产品介绍

甲醛是一种天然存在的物质。环境中高达90%的甲醛可能来自大气上层的自然过程。在生物体内，甲醛及其寡聚物和水合物很少存在。甲烷生成过程会通过类甲醛中间体进行，但这个单碳分子以亚甲基形式结合在甲烷蝶呤中。甲醛是甲醇毒性的主要来源，因为甲醇会被酒精脱氢酶代谢为有毒的甲醛。

Amplite®荧光法甲醛定量检测试剂盒采用专利荧光染料，该染料与甲醛反应后会产生强荧光产物。该试剂盒提供了一种高灵敏度的"混合即读"式检测方法，可便捷地应用于96孔板或384孔板检测体系，且无需分离步骤即可实现自动化操作，使用荧光酶标仪即可轻松读取信号。

 

适用仪器

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荧光酶标仪
Ex:	410nm
Em：	525nm
cutoff:	495nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

标准操作流程

实验概览

1.配制甲醛标准品/测试样本（50 µL/孔）

2.加入AldeLight™ Green工作液（50 µL/孔）

3.室温孵育20-60分钟

4.荧光检测（激发/发射=410/525 nm，截止495 nm）

 

储备液配制

所有储备液应分装为单次使用量，-20°C保存，避免反复冻融

AldeLight™ Green储备液（500×）：

向AldeLight™ Green（组分A）中加入20 µL DMSO（组分D），配制500×储备液

甲醛标准液（123 mM）：

取5 µL 37.2%甲醛标准品（组分C）加入0.5 mL检测缓冲液（组分B），配制123 mM标准液

 

甲醛标准品梯度稀释

推荐使用系列稀释计算工具：https://www.aatbio.com/tools/serial-dilution/10057

1.取12.2 µL 123 mM甲醛标准液加入0.5 mL检测缓冲液（组分B），配制3 mM中间液

2.用检测缓冲液将3 mM中间液按1:10稀释，得300 µM FS7标准液

3.以FS7为起始，按1:3梯度稀释制备FS6-FS1系列标准品（均使用组分B缓冲液）

 

工作液配制

向5 mL检测缓冲液（组分B）中加入10 µL 500× AldeLight™ Green储备液，混匀即得工作液

注：5 mL工作液可满足1块96孔板检测

       工作液稳定性差，建议2小时内使用

 

样品分析

表1.固体背96孔微孔板中甲醛标准品和测试样品的布局。 FS =甲醛标准品（FS1-FS7,0.41至300μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
FS1	FS1	...	...
FS2	FS2	...	...
FS3	FS3
FS4	FS4
FS5	FS5
FS6	FS6
FS7	FS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
FS1-FS7	50ul	连续稀释液（0.41至300μM）
BL	50ul	分析缓冲液
TS	50ul	测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备甲醛标准品（FS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向甲醛标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLAldeLight Green工作溶液，使总甲醛测定体积为100μL/孔。 384孔板，每个孔中加入25μLAldeLight Green工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.室温避光孵育反应20至60分钟。

4.使用荧光酶标仪在 Ex/Em = 410/525 nm（截止波长 = 495nm）处监测荧光的增加。