Amplite 荧光法汞离子定量试剂盒

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产品优势

1.超高灵敏度：检测限低至8 µM（100 µL反应体系）

2.卓越选择性：专利探针Mercury Lite™ 590与Hg²⁺结合后产生>500倍的荧光增强

3.操作便捷性：适配常规荧光酶标仪检测

 

适用范围

用于汞离子检测

 

产品介绍

汞离子（Hg²⁺）作为一种重要的金属离子，在多种生物过程中发挥作用，但同时也是最具危害性的污染物之一。其高毒性主要源于与生物配体（如蛋白质、DNA和酶）中巯基的强亲和力，当通过环境进入人体后，可导致微管结构异常、离子通道功能障碍以及线粒体损伤，并对肾脏、心脏、大脑、胃肠道、中枢神经系统和免疫系统造成显著损害。更严重的是，汞离子会通过食物链或大气在生态系统中持续累积，且因其不可降解特性而具有极长的大气滞留时间。鉴于其对环境和生物系统的重大影响，汞离子的检测研究备受关注。然而，目前市场上能够实现汞离子快速检测的商业产品极为有限。开发高选择性、高灵敏度的汞离子检测方法具有重要的毒理学和环境监测价值。

Amplite®荧光法汞离子定量检测试剂盒提供了一种基于荧光信号的高效检测方案，该技术为环境监测和毒理学研究提供了可靠的汞离子定量工具。

 

Hg²⁺检测样品分析方案

概述

1.准备汞工作溶液（50μL）

2.添加汞（II）标准品或测试样品（50μL）

3.在室温下孵育20-30分钟

4.在Ex / Em = 540/590 nm处监测荧光强度重要事项为了获得佳效果，强烈建议使用黑色板。 在开始实验之前，在室温下解冻试剂盒组分

 

操作步骤

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。

 1.Mercury Lite 590原液（200X）：

将25μLDMSO加入到Mercury Lite 590（组分A）的小瓶中并充分混合，避光。

注意单次使用等分试样，并将未使用的200X Mercury Lite 590原液储存在-20℃，避免光照和重复冻融循环。

 

2.汞（II）标准储备液（未提供）：

我们使用高氯酸汞（II）水合物（Sigma 529656，CAS＃304656-34-6）作为汞（II）标准。在ddH 2 O中制备浓度为1mM的汞（II）储备溶液。

 

3.汞（II）标准液配制

使用ddH2O进行1：2连续稀释，得到约500,250,125,62.5，

31.3,15.6和7.8μM连续稀释的汞（II）标准品（M7-M1）。

 

4.工作溶液配制

将25μLMercuryLite™590原液添加到5 mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合（组分A + B）。

注意这种汞工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

 

5.实验步骤

5.1根据表1和2中提供的布局准备和添加汞（II）标准品（M），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每个使用25μL试剂 而不是50μL。

5.2向每个汞（II）标准孔，空白对照和测试样品中加入50μL汞工作溶液，使总汞测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μL汞工作溶液，总体积为50μL/孔。

5.3在室温下孵育反应20-30分钟，避光。

5.4用Ex / Em = 540 / 590nm，截止值570nm的荧光板读数器监测荧光增加。