Amplite 荧光法锌离子定量试剂盒

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适用范围

用于锌离子检测

产品介绍

锌作为人体必需的微量矿物质元素，在多种生物过程中发挥着关键作用。它是多种酶活性中心、蛋白质结构维持以及基因表达调控不可或缺的因子。锌的生理状态直接影响细胞分裂、生长、分化、发育和衰老等基础生命过程。临床锌缺乏症状表现为肢端皮炎、免疫力低下、腹泻、伤口愈合迟缓、发育停滞、性腺功能减退、胎儿生长受限、致畸甚至流产等。在科研和药物研发领域，亟需简便、直接且支持自动化操作的锌检测方案。

AAT Bioquest公司开发的Amplite®荧光法锌定量检测试剂盒，独家专利探针Metal Fluor™ Zn 520，为生物样本中的锌浓度检测提供了高效解决方案。该探针具有三大技术优势：

1）与锌离子结合后可产生200~300倍的荧光增强效应；

2）对Zn²⁺具有高度特异性，几乎不与Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺和Cu²⁺等其他金属离子发生交叉反应；

3）检测灵敏度达0.2 µM（13 ng/mL），适用于血清、血浆和尿液等多种生物样本的检测。

Zn²⁺检测样品分析方案

概述

测试样品（50μL）或Zn²⁺

添加锌探针试剂50μL

在室温下孵育5-10分钟读取A610nm / A480nm的吸光度比

操作步骤

1.ZnCl₂标准品和试样制剂：

1.1将10μL的100mM ZnCl₂标准溶液（组分C）加入990L测定缓冲液（组分B）中，得到1mM ZnCl₂标准溶液。

1.2将10μL的1mM锌标准溶液（组分C）加入到990L测定缓冲液（组分B）中，得到100μMZnCl₂标准溶液。

1.3取300μL的100μMZnCl2标准溶液（来自步骤1.2）进行1：2连续稀释，得到50,25,12.5,6.25,3.13,1.56和0μM连续稀释的ZnCl2标准品。

1.4用测定缓冲液（组分B）将测试样品稀释至5-100μM范围。加入50μLZnCl2标准品，稀释样品并对照到每个孔中，如说明书中的表1和2所示。

2.运行锌测定：

2.1将25μLZn-620（组分A）加入5 mL测定缓冲液（组分B）中以制备Zn测定混合物。 向ZnCl₂标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLZn测定混合物（参见说明书中步骤1.5，表1和2）以使总ZnCl₂测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

2.2在室温下孵育反应5-10分钟，避光。

2.3用吸光度读板仪在610 nm和480 nm处检测吸光度的增加。