钙黄绿素绿，AM
| Ex (nm) | 492 | Em (nm) | 514 |
| 分子量 | 607.47 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.多色标记兼容性：突破传统Calcein AM单色限制，发射光谱与GFP完全区分
2.细胞渗透性好：可自由穿透活细胞膜，经水解后生成强荧光
适用范围
用于检测细胞活力
产品介绍
Calcein UltraGreen™ AM 可高效穿透活细胞膜，经细胞内酯酶水解去除AM基团后，生成的荧光分子将被有效滞留在细胞内。相较于传统Calcein AM，Calcein UltraGreen™ AM具有以下显著优势：1.更低的细胞毒性；2.更长的细胞内滞留时间；3.对淋巴细胞增殖、趋化等生理功能无显著影响；因此，该探针是活细胞标记的更优选择。
选择指南
| Dye | Calcein Blue | CytoCalcein™ Violet 450 | Calcein UltraBlue™ | CytoCalcein™ Violet 500 | Calcein UltraGreen™ | Calcein | Calcein Orange™ | Calcein Red™ | Calcein Deep Red™ | |
| 原理 | 在活细胞中，非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。 | |||||||||
| 荧光效果 | 活细胞具有高度荧光，很容易与无荧光的死细胞区分开。 | |||||||||
| Laser(nm) | UV (350) | Violet (405) | UV (350) | Violet (405) | Blue (488) | Blue (488) | Green (532) | Yellow (561-568) | Red (633-647) | |
| Ex/Em(nm) | 354/441 | 406/445 | 359/458 | 420/505 | 492/514 | 501/521 | 531/545 | 562/576 | 643/663 | |
| 是否复用 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 | |
| 染料相容性 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 | |
| 样品类型 | 活细胞 | |||||||||
| 适用仪器 | 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪 | |||||||||
| 货号 | 22007 | 22012 | 21908 | 22013 | 21905 | 22003 | 22009 | 21900 | 22011 | |
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC通道 |
|
荧光显微镜 |
|
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
|
荧光酶标仪 |
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| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式： | 底读模式 |
操作步骤
储备溶液配制
所有未使用的储备溶液均应分装成单次使用量，并于-20°C保存（除非另有说明）。避免反复冻融。
Calcein Ultragreen™ AM储备液
使用优质无水DMSO配制2-5 mM的Calcein Ultragreen™ AM储备液。
注：DMSO溶解后的Calcein UltraGreen™ AM溶液应呈透明无色状态。
工作液配制
Calcein UltraGreen™ AM工作液
选择合适缓冲液（如Hanks或Hepes缓冲液）配制1-10 µM工作液。多数细胞系推荐使用4-5 µM终浓度，具体浓度需通过实验优化。
注：1.可添加非离子型表面活性剂Pluronic® F-127提高AM酯水溶性，染色缓冲液中建议终浓度为0.02%（AAT Bioquest提供多种Pluronic® F-127产品）。AM酯类试剂应避免与Pluronic® F-127长期共存。
2.若细胞存在有机阴离子转运体，可加入1-2.5 mM丙磺舒或0.1-0.25 mM苯磺唑酮以减少水解产物外排（AAT Bioquest同时提供即用型水溶性丙磺舒钠盐等系列产品）。
实验操作流程
1.移除培养基，用无血清缓冲液洗涤细胞一次
2.加入Calcein UltraGreen™ AM工作液，37°C孵育30-60分钟
3.更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液
4.可选择以下任一检测方式检测荧光强度
配备FITC滤光片的荧光显微镜
配置蓝色激光器和530/30 nm滤光片（FITC通道）的流式细胞仪
荧光酶标仪（激发/发射=490/525 nm，截止515 nm）
试剂应用文献
Investigation into the role of H2-Ab1 in vascular remodeling in pulmonary arterial hypertension via Bioinformatics
Authors: Wang, Guowen and Wang, Zhuoyan
Journal: BMC Pulmonary Medicine (2024): 1--12
