Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光
Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 522 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.稳定性好,支持高通量筛选平台
2.可定量凋亡细胞中caspase 9活性也可筛选caspase 9抑制剂
适用范围
用于监测细胞凋亡
产品介绍
Cell Meter™细胞检测试剂盒用于监测细胞功能的专业工具。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒通过检测caspase 9活性来监测细胞凋亡过程。
caspase 9属于CED-3蛋白亚家族,能够激活下游caspase-3、-6和-7等蛋白酶,引发级联反应。该蛋白酶在中枢神经系统发育过程中起关键作用,对LEHD肽段序列具有高度特异性。试剂盒采用(Ac-LEHD)2-R110作为荧光底物,当caspase 9酶切R110肽段后会产生强荧光信号(激发波长480-500nm/发射波长520-530nm)。本产品提供完整检测试剂,方法稳定可靠,适用于高通量筛选,可定量凋亡细胞中caspase 9活性或筛选其抑制剂,已被众多实验室成功应用于高通量筛选研究。
适用仪器
荧光酶标仪 | |
Ex: | 490 nm |
Em: | 525 nm |
Cutoff: | 515 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 顶/底读模式 |
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物制备细胞
2.加入等体积的Caspase 9工作溶液
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光
工作溶液配制
将50μLCaspase9底物(组分A)加入10mL测定缓冲液(组分B)中并充分混合。
操作步骤
1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。 对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在5%CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间以诱导细胞凋亡。
3.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的半胱天冬酶9工作溶液。
4.将工作溶液板在室温下孵育至少1小时,避光。
注意:如果需要,在室温下加入测定加样溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂,以确认对caspase 9样活性的抑制。
5.将细胞板(特别是悬浮细胞)以800rpm离心2分钟(关闭制动器)。
6.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度
试剂应用文献
Authors: Aida, Rieko and Okano, Kazunori and Nakata, Kyoko and Hagiwara, Hiromi
Journal: Anticancer Research (2025): 2781--2790
Authors: Tan, Yu and Hu, Ailing and Lu, Jingya and Lin, Yunhai and Li, Xuejing and Yamaguchi, Takuji and Tabuchi, Masahiro and Kawakami, Zenji and Ikarashi, Yasushi and Kobayashi, Hiroyuki
Journal: Biology (2025): 202