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Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光

英文名称:Cell Meter™ Cell Viability Assay Kit *Blue Fluorescence*
产品参数
Ex (nm)-Em (nm)-
分子量-溶剂-
存储条件-
产品概述

产品货期

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产品优势  

1.用于增殖期和非增殖期细胞

2.适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台

 

适用范围

用于监测细胞活力

 

产品介绍

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是一套用于监测细胞活性的多功能工具集。细胞活性可通过多种参数进行检测,本试剂盒采用专利染料,该染料进入活细胞后荧光信号显著增强。这种疏水性化合物能轻松穿透完整活细胞的细胞膜,其弱荧光底物经细胞内酯酶水解后,可转化为强荧光亲水性产物并稳定保留在细胞质中。

由于酯酶活性与活细胞数量成正比,因此通过检测酯酶催化荧光底物水解产物的荧光强度,即可直接反映细胞活性。使用黑色壁板培养的细胞可在两小时内完成染色和定量分析。与传统四唑盐(tetrazolium salt)或Alamar Blue™检测法相比,本检测方案具有更优异的稳定性。

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒可轻松适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台。包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。

96孔板:每孔100 µL,可完成500次检测;384孔板:每孔25 µL,可完成2000次检测

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 360 nm
Em: 450 nm
Cutoff: 420 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Blue,AM工作溶液(96孔板:100μL/孔 ;384孔板: 25μL/孔 )
在室温或37°C孵育1小时
在Ex / Em = 360/450 nm(截止= 420 nm)监测荧光强度(底部读取)

 

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。
CytoCalcein Blue,AM原液:
将20μLDMSO(组分B)加入到CytoCalcein Blue,AM(组分A)的小瓶中,并充分混合以制备CytoCalcein Blue,AM储备溶液。

注意:20μL的CytoCalcein Blue,AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时,密封管。

 

2.工作溶液配制

将20μL的CytoCalcein Blue,AM储备溶液加入10mL测定缓冲液(组分C)中,并充分混合以制备CytoCalcein Blue,AM工作溶液。 这种CytoCalcein Blue,AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。

注意:如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白,应制备丙磺舒储备溶液,并加入到加样缓冲液中,孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃。

有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。

注意:在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔(96孔板)和25μL/孔(384孔板)的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液。或者,细胞可以在无血清培养基中生长。

2.添加100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的CytoCalcein Blue,AM工作溶液。

3.将板在室温或37°C孵育1小时,避光。 (孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到结果,孵育时间少于4小时)。

注意:适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

注意:装载后请勿清洗电池。

注意:悬浮细胞,建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。

4.用Ex / Em = 360 / 450nm(截止= 420nm)的荧光板读数器(底部读取)监测荧光强度。