Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发
| Ex (nm) | 406 | Em (nm) | 445 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
咨询
产品优势
用于增殖期和非增殖期细胞
适用范围
用于监测细胞活力
产品介绍
细胞活性检测可通过多种参数实现。本试剂盒采用的专利紫激光激发荧光染料是一种疏水性化合物，能轻松穿透完整活细胞膜，并在进入活细胞后荧光信号显著增强。该非荧光底物经细胞内酯酶水解后，可生成强蓝色荧光产物并稳定滞留于细胞质内.
经酯酶水解产生的蓝色荧光团具有类似荧光素的光谱特性：在405 nm激发光下，该荧光团可在~450 nm处发射强蓝色荧光。试剂盒提供所有必需组分及专为荧光微孔板检测优化的细胞标记方案。
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒为流式细胞术、微孔板检测及显微细胞功能研究提供高效的细胞标记工具，适用于细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活性、凋亡及毒性等多种研究领域，可同时用于增殖期和非增殖期细胞检测。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 405 nm |
| Em： | 460 nm |
| Cutoff： | 435 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式 |
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本
2.移除培养基
3.加入CytoCalcein™ Violet 450 AM工作液（96孔板：100 µL/孔；384孔板：25 µL/孔）
4.室温或37°C孵育30分钟至1小时
5.检测荧光强度（底部读数模式，激发/发射波长=405/460 nm，截止波长=435 nm）
储备溶液配制
除非另有说明，除非特别说明，所有未使用的储备液应分装后于-20°C保存，避免反复冻融
CytoCalcein™Violet 450 AM储备溶液：
向CytoCalcein™Violet 450 AM小瓶（组分A）中加入20 µL DMSO（组分B），混匀配制成CytoCalcein™Violet 450 AM储备液。
注意：20 µL CytoCalcein™Violet 450 AM储备液可满足一块板的检测需求。需避光保存，严格密封管口。未使用的储备液可分装密封后于<-20°C保存1个月
工作溶液配制
将20 µL CytoCalcein™ Violet 450 AM储备液加入10 mL检测缓冲液（组分C），混匀配制成工作液。
注意：该工作液不稳定，需现配现用
若细胞（如CHO细胞）含有机阴离子转运体导致荧光染料泄漏，需在加载缓冲液中加入终浓度为1-2.5 mM的丙磺舒储备液（丙磺舒储备液分装后≤-20°C保存）
样本制备指南
细胞样本制备方法请参考：https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
操作步骤
1.按实验需求用测试化合物处理细胞
注意：通常无需洗细胞，但若测试化合物对血清敏感，可先吸除含血清培养基，吸除培养基后，可加入100 µL/孔（96孔板）或25 µL/孔（384孔板）1×HHBS缓冲液或其他自选缓冲液。或者，细胞可以生长在无血清的培养基中。
2..加入CytoCalcein™ Violet 450 AM工作液（96孔板：100 µL/孔；384孔板：25 µL/孔）
3..室温或37°C避光孵育30分钟至1小时（孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了在孵育时间小于4小时时的最合适的结果）
注：孵育时间需根据细胞类型和浓度优化
悬浮细胞建议孵育后800 rpm离心2分钟（关闭离心机刹车）
5.使用荧光酶标仪（底部读数模式）检测荧光强度（Ex/Em = 405/460 nm，Cutoff = 435 nm）
