Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光
| Ex (nm) | 494 | Em (nm) | 514 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.用于增殖期和非增殖期细胞
2.适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台
适用范围
用于监测细胞活力
产品介绍
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是一套用于监测细胞活性的多功能工具集。细胞活性可通过多种参数进行检测，本试剂盒采用非荧光的calcein AM，该染料进入活细胞后荧光信号显著增强。calcein AM是一种疏水化合物能轻松穿透完整活细胞的细胞膜，细胞内酯酶对非荧光的calcein AM进行水解，生成强烈荧光的亲水性calcein，稳定保留在细胞质中。
由于酯酶活性与活细胞数量成正比，因此通过检测酯酶催化荧光底物水解产物的荧光强度，即可直接反映细胞活性。使用黑色壁板培养的细胞可在两小时内完成染色和定量分析。与传统四唑盐（tetrazolium salt）或Alamar Blue™检测法相比，本检测方案具有更优异的稳定性。
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒可轻松适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台。包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。
96孔板：每孔100 µL，可完成500次检测；384孔板：每孔25 µL，可完成2000次检测
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式 |
样品实验方案
简要概述
用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Green，AM工作溶液（96孔板：100μL/孔；384孔板：25μL/孔 ）
在室温或37°C孵育1小时
检测荧光强度
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。
CytoCalcein Green，AM原液：
将20μLDMSO（组分B）加入到CytoCalcein green，AM（组分A）的小瓶中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM储备溶液。
注意：20μL的CytoCalcein green，AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时，密封管。
2.工作溶液配制
将20μL的CytoCalcein green，AM储备溶液加入10mL测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM工作溶液。 这种CytoCalcein green，AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。
注意：如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中，孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃
操作步骤
1.根据需要用测试化合物处理细胞。
注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。
2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein green，AM工作溶液。
3.将板在室温或37°C孵育1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了结果，孵育时间少于4小时）。
注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
注意：装载后请勿清洗电池。
注意：对于悬浮细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。
4.用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光板读数器监测荧光强度。
