Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测*
Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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产品优势
1.用于增殖期和非增殖期细胞
2.适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台
适用范围
用于监测细胞活力
产品介绍
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是一套专业化的细胞活力监测工具。细胞活力检测可通过多种参数实现,本试剂盒采用专利荧光染料,该染料进入活细胞后荧光信号显著增强。作为疏水性化合物,该染料能轻松穿透完整活细胞膜。弱荧光底物经细胞内酯酶水解后,可转化为强荧光亲水性产物并稳定滞留于细胞质中。
酯酶活性与活细胞数量呈正相关,因此通过检测酯酶催化荧光底物水解产物的荧光强度,即可直接反映细胞活力。使用黑色壁培养板时,细胞染色及定量检测可在两小时内完成。相较于传统的四唑盐(tetrazolium salt)或Alamar Blue™检测法,本方法具有更优异的稳定性。
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒可轻松适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台。包括细胞粘附性、趋化作用、药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。适合于增殖型和非增殖型细胞,也可用于悬浮和贴壁细胞。
96孔板:每孔100 µL,可完成200次检测;384孔板:每孔25 µL,可完成800次检测
适用仪器
荧光酶标仪 | |
Ex: | 635 nm |
Em: | 670 nm |
Cutoff: | 665 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 底读模式 |
样品实验方案
简要概述
准备含测试化合物的细胞溶液
取出介质
加入CytoCalcein™NIR工作溶液(96孔板:100 µL /孔;384孔板:25 µL /孔 )
在室温或37°C下孵育1小时
在Ex / Em = 635/670 nm(截止= 665 nm)时读取荧光强度(底部读取模式)
溶液配制
1.储备溶液配制
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融。
CytoCalcein™NIR储备溶液:
将20 µL DMSO(组分B)添加到CytoCalcein™NIR(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成CytoCalcein™NIR储备液。
注意:20 µL CytoCalcein™NIR储备液足以装满一块板。 避光。 为了存放,请将管子密封。
2.工作溶液配制
将20 µL CytoCalcein™NIR储备溶液添加到瓶中的测定缓冲液(10 mL,组分C)中并充分混合以制成CytoCalcein™NIR工作溶液。
注意:此CytoCalcein™NIR工作溶液足够一块细胞板,在室温下至少可稳定2小时。
操作步骤
1.根据需要用测试化合物处理细胞。
注意:添加化合物之前不必洗涤细胞。但是,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔(96孔板)和25 µL /孔(384孔板)的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或抽吸后选择的缓冲液。或者,细胞可以在无血清培养基中生长。
2.从细胞中除去培养基。
注意:加载CytoCalcein™NIR工作溶液之前,必须除去培养基。
3.加入100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的CytoCalcein™NIR工作溶液。
4.在室温或37°C下避光放置1小时。
注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。对于悬浮细胞,建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟,然后制动。
5.使用荧光酶标仪(底部读取模式)在Ex / Em = 635/670 nm(截止= 665 nm)下监控荧光强度。