Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光
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产品优势
1.用于增殖期和非增殖期细胞,既能检测悬浮细胞也适用于贴壁细胞
2.适配微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等多种高通量检测平台
适用范围
用于监测细胞活力
产品介绍
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是一套用于监测细胞活性的工具集。细胞活性的监测可通过多种参数实现,本试剂盒采用一种专利非荧光染料,该染料进入活细胞后会增强红色荧光信号。这种疏水性化合物能轻松穿透完整活细胞的细胞膜,经细胞内酯酶水解后,非荧光底物会转化为强荧光亲水性产物,并稳定保留在细胞质中。酯酶活性与活细胞数量成正比,因此可通过荧光底物经酯酶催化水解产生的荧光强度直接反映细胞活性。使用黑色壁板培养的细胞可在两小时内完成染色和定量检测。
与传统四唑盐(tetrazolium salt)或Alamar Blue™检测法相比,本检测方案具有更强的稳定性。该技术可轻松适配多种高通量检测平台,包括微孔板检测、免疫细胞化学分析和流式细胞术等,适用于细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活性、细胞凋亡及细胞毒性等多种研究领域。试剂盒提供所有必需组分及经过优化的细胞标记方案。
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒适用于增殖期和非增殖期细胞,既能检测悬浮细胞也适用于贴壁细胞。其荧光指示剂的光谱特性与Cy3/TRITC滤光片组兼容
适用仪器
荧光酶标仪 | |
Ex: | 540 nm |
Em: | 590 nm |
Cutoff: | 570 nm |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
读取模式: | 底读模式 |
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本
2.移除培养基
3.加入CytoCalcein™ Red AM工作液(96孔板:100 µL/孔;384孔板:25 µL/孔)
4.室温或37°C孵育30分钟至1小时
5.检测荧光强度(底部读数模式,激发/发射波长=540/590 nm,截止波长=570 nm)
储备溶液配制
除非另有说明,除非特别说明,所有未使用的储备液应分装后于-20°C保存,避免反复冻融
CytoCalcein™Red AM储备溶液:
向CytoCalcein™Red AM小瓶(组分A)中加入20 µL DMSO(组分B),混匀配制成CytoCalcein™Red AM储备液。
注意:20 µL CytoCalcein™Red AM储备液可满足一块板的检测需求。需避光保存,严格密封管口。未使用的储备液可分装密封后于<-20°C保存1个月
工作溶液配制
将20 µL CytoCalcein™ Red AM储备液加入10 mL检测缓冲液(组分C),混匀配制成工作液。
注意:该工作液不稳定,需现配现用
若细胞(如CHO细胞)含有机阴离子转运体导致荧光染料泄漏,需在加载缓冲液中加入终浓度为1-2.5 mM的丙磺舒储备液(丙磺舒储备液分装后≤-20°C保存)
样本制备指南
细胞样本制备方法请参考:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
操作步骤
1.按实验需求用测试化合物处理细胞
注意:通常无需洗细胞,但若测试化合物对血清敏感,可先吸除含血清培养基,吸除培养基后,可加入100 µL/孔(96孔板)或25 µL/孔(384孔板)1×HHBS缓冲液或其他自选缓冲液
2.移除培养基
3.加入CytoCalcein™ Red AM工作液(96孔板:100 µL/孔;384孔板:25 µL/孔)
4.室温或37°C避光孵育30分钟至1小时
注:孵育时间需根据细胞类型和浓度优化
悬浮细胞建议孵育后800 rpm离心2分钟(关闭离心机刹车)
5.使用荧光酶标仪(底部读数模式)检测荧光强度(Ex/Em = 540/590 nm,Cutoff = 570 nm)