Cell Meter 比色细胞毒性检测试剂盒

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产品优势

1.性能稳定、操作便捷，可轻松适配多种仪器平台

2.支持96孔板或384孔板微孔板检测模式

3.传统四唑盐比色法，无需预先混合组分，且具有更高的检测灵敏度

 

适用范围

用于细胞毒性检测

 

产品介绍

监测细胞毒性是研究细胞功能最为关键的任务之一。我们的Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞活力的工具组合。本产品采用一种专利水溶性细胞膜通透染料，该染料在细胞还原环境下会发生吸收光谱变化，其吸光度比值变化与活细胞数量直接相关。

Cell Meter 比色细胞毒性检测试剂盒具有高灵敏度、无放射性且无需洗涤步骤等特点，适合用于高通量筛选化合物诱导的细胞增殖或毒性效应。与传统四唑盐比色法（如WST-8、MTT和XTT）相比，本试剂盒无需预先混合组分，且具有更高的检测灵敏度。常规包装可进行1000次检测，大包装可满足5000次检测需求。

所有组分稳定性优异，细胞毒性极低，可根据实验需要延长孵育时间（如24至48小时）。Cell Meter 比色细胞毒性检测试剂盒性能稳定、操作便捷，可轻松适配多种仪器平台，支持96孔板或384孔板微孔板检测模式。

 

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吸光度酶标仪
吸光度:	570/60 nm
推荐孔板:	黑色透明底板

样品实验方案

简要概述

1.制备含测试化合物的细胞（96孔板每孔100 µL，384孔板每孔50 µL）

2.添加1/5体积的分析溶液（组分A）

3.将细胞在37℃，5％CO 2培养箱中孵育1-24小时

4.监测A570nm / A605nm的吸光度比

 

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。将测试化合物添加到细胞中，并在37℃，5％CO 2培养箱中孵育所需的一段时间（例如24,48或96小时）。空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。 96孔板，建议的总体积为100μL，384孔板，建议的总体积为50μL。

 

2.对照设置
A.阳性对照：含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。

B.阴性对照：含细胞，无测试化合物

C.载体对照：含细胞及化合物载体溶剂

D.无细胞对照：仅含培养基。

E.测试化合物对照：含化合物载体溶剂（如HBSS或PBS）及测试化合物

注意： 某些化合物可能因自发荧光导致假阳性结果。所有对照组体积需与实验组一致（96孔板100 µL/384孔板50 µL）。*

3.将测定溶液（组分A）预热至37°C。 在开始实验之前充分混合。

4.向每个孔中加入20μL（96孔板）或10μL（384孔板）的测定溶液（组分A）。 轻轻摇动平板30秒，混合试剂。

5.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育1-24小时，避光。

注意：适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 不推荐极长的孵育时间，因为指示剂可以转化为无色化合物。

6.使用酶标仪监测A570nm/A605nm吸光度比值变化。 OD₅₇₀与OD₆₀₅的比率用于确定每个孔中的细胞活力。

注意：细胞存活率与OD₅₇₀增加和OD₆₀₅减少成正比。

 

数据分析

        从含有细胞的那些孔的值中减去从非细胞对照孔读取的背景吸光度。注意：空白孔的背景吸光度可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。

        每个孔中的吸光度读数表示孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比：
％细胞活力= 100×（Rsample - Ro）/（Rctrl - Ro）
Rsample是在测试化合物存在下OD570 / OD605的吸光度比。
Rctrl是不存在测试化合物（载体对照）时OD570 / OD605的吸光度比。
Ro是OD570 / OD605的平均背景（非细胞对照）吸光度比。

        从空白标准孔获得的读数（Abs）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算细胞数/孔样品。

图1.用Cell Meter 比色细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量反应。 将1至10个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液（组分A）在37℃下孵育3小时。用SpectraMax plus（Molecular Devices）在570nm和605nm下测量吸光度强度。 OD570 / OD605的比例与所示的细胞数成比例。