Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒
| Ex (nm) | 571 | Em (nm) | 584 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品货期
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产品优势
1.检测灵敏度（<100个CHO细胞）高于MTT等方法
2.组分稳定性高，毒性低，支持长时孵育（24-48小时）
3.适配增殖/非增殖细胞、悬浮/贴壁细胞
适用范围
细胞毒性检测
产品介绍
Cell Meter™荧光法细胞毒性检测试剂盒是用于监测细胞活力的专业工具系列，通过多种参数评估细胞状态。其中，线粒体脱氢酶（如LDH）活性检测是公认的细胞定量与活力监测方法。本试剂盒刃天青（resazurin）被活细胞线粒体呼吸链还原为荧光试卤灵（resorufin）的原理，提供快速、精准的均相荧光检测方案，其荧光强度与活细胞数直接成正比。
相比MTT等方法，本试剂盒具有更高检测灵敏度（<100个CHO细胞），且组分稳定性好、细胞毒性低，支持24-48小时长时孵育。非放射性、免洗的特性使其适用于96/384孔板格式的高通量筛选，兼容各类化合物增殖/细胞毒性检测及多仪器平台。该方案优化适配增殖/非增殖细胞、悬浮/贴壁细胞等多种研究需求。
96孔板：20 µL/孔，可完成1000次检测；384孔板：10 µL/孔，可完成2000次检测
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 540 nm |
| Em： | 590 nm |
| Cutoff： | 570 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式 |
样品实验方案
简要概述
1.制备含测试化合物的细胞样本（ 96孔板：100μL/孔；384孔板：50μL/孔）
2.加入1/5体积的检测溶液（组分A）
3.将细胞在37℃，5％CO2培养箱中孵育1-24小时
4.底部读数模式检测荧光强度（Ex/Em=540/590 nm，截止波长570 nm）
操作步骤
1.在黑色透明底培养板中铺板100-10,000个细胞/孔。加入测试化合物后，37°C，5% CO₂培养箱孵育（建议时间：24/48/96小时），空白对照孔（无细胞培养基）加入等量化合物缓冲液。建议总体积：96孔板：100 µL；384孔板：50 µL
2.对照组设置
A阳性对照：细胞+已知增殖/细胞毒性诱导剂
B阴性对照：细胞（不加测试化合物）
C溶剂对照：细胞+化合物溶剂
D非细胞对照：无细胞培养基
注：血清中的LDH会导致背景荧光
E化合物对照：化合物溶剂（HBSS或PBS）+测试化合物
注：某些化合物具有强自发荧光，可能导致假阳性
*注：所有对照组的总体积需与实验组匹配（96孔板：100 µL/孔；384孔板：50 µL/孔），使用生长培养基调整体积。*
4.向每个孔中加入20μL/孔（96孔板）或10μL/孔（384孔板）的测定溶液（组分A）。 轻柔震荡混匀30秒。
5.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中避光孵育1-24小时。
6.使用荧光酶标仪（底部读数模式）检测荧光强度，参数设置：Ex/Em = 540/590 nm (截止波长 = 570nm).
根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比：
％细胞活力= 100×（Fsample-Fo）/（Fctrl-Fo）
Fsample是在测试化合物存在下的荧光读数。
Fctrl是不存在测试化合物（载体对照）时的荧光读数。
Fo是平均背景（非细胞对照）荧光强度。
从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算CHO-K1细胞样品。
| 图1.用Cell Meter 荧光细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量响应。 将0至10,000细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液（组分A）在37℃下孵育3小时。 用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在Ex / Em = 540 / 590nm（截止值= 570nm）下测量荧光强度。 荧光强度与所示的细胞数呈线性关系（R2 = 0.998）。 |
