Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测
Ex (nm) | 503 | Em (nm) | 527 |
分子量 | - | 溶剂 | - |
存储条件 | - |
产品货期
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适用范围
用于细胞周期检测
产品介绍
Cell Meter™细胞检测试剂盒是用于监测细胞活力和增殖的工具。监测细胞活力和增殖可采用多种参数指标。在正常细胞中,DNA密度会随着细胞所处的状态(生长、分裂、静止或执行常规功能)发生变化。细胞周期的进程受到多种细胞周期调控因子的复杂相互作用控制。这些调控因子会激活转录因子,转录因子与 DNA 结合后,会启动或抑制某些蛋白质的合成,最终导致细胞分裂。这一调控级联反应中的任何异常都可能导致细胞异常增殖,进而引发肿瘤形成等多种病理状况。
这类活细胞研究的潜在应用包括:测定细胞 DNA 含量和细胞周期分布以检测生长模式的变化、监测细胞凋亡,以及评估肿瘤细胞行为和抑癌基因机制。
Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒采用Nuclear Green™ LCS1染料,可对活细胞、透化细胞和固定细胞的细胞周期进程及增殖情况进行监测。通过流式细胞术(FL1检测通道)可精确测定样本中处于G0/G1期、S期、G2/M期以及凋亡前亚G1期细胞的比例
适用仪器
流式细胞仪 | |
Ex: | 488 nm |
Em: | 530/30 nm |
通道: | FITC 通道 |
实验方案概览
操作流程摘要
1.制备含测试化合物的细胞悬液(细胞密度5×10⁵至1×10⁶个细胞/mL)
2.向0.5 mL细胞悬液中加入2.5 µL 200X Nuclear Green™ LCS1
3.置于37°C、5% CO₂培养箱孵育30-60分钟
4.使用530/30 nm滤光片(FITC通道)进行流式细胞分析
重要提示:实验前需将所有组分恢复至室温
细胞制备
细胞样本制备指南详见:https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
标准实验流程
1.将细胞重悬于预热的培养基或自选缓冲液中(0.5 mL/样本,密度5×10⁵至1×10⁶个细胞/mL)
注:不同细胞系需单独评估最佳凋亡诱导密度
2.用测试化合物处理细胞至预期时间(诱导凋亡或调控细胞周期)
3.加入2.5 µL 200X Nuclear Green™ LCS1(组分A)。
4.将细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中孵育30至60分钟。
贴壁细胞,需使用0.5 mM EDTA温和消化以保持细胞完整性,并在使用Nuclear Green™ LCS1孵育前用含血清培养基洗涤一次。具体孵育时间需根据所用细胞类型及浓度进行优化,建议每次实验前确定最合适条件。由于Nuclear Green™ LCS1染料具有细胞膜穿透性,因此染色前无需对细胞进行固定处理。
5.可选:将细胞1000 rpm离心4分钟,用0.5 mL Assay Buffer(组分B)或自选缓冲液重悬
6.流式检测:使用530/30 nm滤光片(FITC通道)检测荧光强度,设门分析目标细胞群(排除碎片干扰)