Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发
| Ex (nm) | 401 | Em (nm) | 460 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
产品货期
咨询
适用范围
用于细胞周期检测
产品介绍
细胞周期包含四个连续时相：G0/G1期、S期、G2期和M期。细胞在经历细胞周期的过程中，其DNA会在S期（合成）完成复制，并在M期（分裂期）平均分配到两个子细胞中。这两个阶段由两个间隙期（G0/G1 期和 G2 期）分隔开来，两个间隙期为细胞提供了生长的时间，使细胞内的蛋白质和细胞器数量翻倍。细胞还会利用这两个时期监测内部和外部环境条件，再进入细胞周期的下一个阶段。
Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒采用Nuclear Violet™染料，在活细胞中监测细胞周期进程和增殖情况。通过流式细胞术可测定样本中处于G0/G1期、S期、G2/M期以及凋亡前亚G1期细胞的比例。经 Nuclear Violet™染色的细胞可通过流式细胞仪（Pacific Blue® 通道）进行检测。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 405 nm |
| Em： | 450/40 nm |
| 通道: | Pacific Blue 通道 |
实验方案概览
操作流程摘要
1.制备密度为5×10⁵至1×10⁶个细胞/mL的测试化合物处理细胞
2.向0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Nuclear Violet™染色液
3.置于37°C、5% CO₂培养箱孵育30-60分钟
4.使用405 nm紫激光的流式细胞仪进行分析
重要提示：实验前需将所有组分恢复至室温
标准实验流程
1.每份样本准备0.5 mL温育培养基或自选缓冲液，调整细胞密度至5×10⁵-1×10⁶个细胞/mL
注：需根据细胞系特性优化凋亡诱导的最佳细胞密度
2.使用测试化合物处理细胞特定时间以诱导凋亡或调控周期功能
3.向细胞培养液中加入1 µL 500X Nuclear Violet™（组分A）
4. 37°C、5% CO₂培养箱孵育30-60分钟
注：贴壁细胞需用0.5 mM EDTA轻柔消化后，用含血清培养基洗涤一次
合适孵育时间需根据细胞类型和浓度优化
本染料具有细胞膜穿透性，无需固定处理
人/鼠干细胞会外排Nuclear Violet™染料（侧群细胞技术原理），可联合使用维拉帕米、夫马菌素C等阻断剂提高检测准确性
5.可选：将细胞1000 rpm离心4分钟后，用0.5 mL检测缓冲液（组分B）或自选缓冲液重悬
6.用405 nm紫激光流式细胞仪（Ex/Em = 405/445 nm）检测荧光强度设门分析目标细胞群（排除碎片干扰）
